Calreticulin as a Molecular Adjuvant in Cancer Immunotherapy

Abstract

Intratumoral immunotherapy is a promising strategy in cancer treatment aimed at overcoming the immunosuppressive tumor microenvironment and triggering a local immune activation, which can further lead to systemic anti-tumor responses. Calreticulin, a key mediator released during immunogenic cell death, has been proposed as a promising target for cancer immunotherapy due to its immunostimulatory features and ability to enhance phagocytosis of tumor cells. This diploma thesis investigates the role of calreticulin as an adjuvant in intratumoral immunotherapy, administered alone or in combination with TLR agonists. Using two different murine tumor models, the poorly immunogenic B16-F10 melanoma and the immunogenic MC38 colon carcinoma, we evaluated the therapeutic efficacy of intratumoral CRT administration. While calreticulin alone did not show significant therapeutic effect in either model, the combination of CRT with TLR agonists led to notable therapeutic benefit for MC38-beraing mice. The combination therapy resulted in prolonged survival, reduced tumor growth, and a trend toward increased infiltration of dendritic and CD8+ T cells in the tumor microenvironment. Furthermore, treated mice exhibited markers of a systemic, durable, and tumor-specific adaptive immune response. These findings suggest...

Intratumorální imunoterapie představuje slibnou strategii protinádorové léčby, jejímž cílem je překonat imunosupresivní prostředí nádoru a indukovat lokální aktivaci imunitního systému, s potenciálem navodit i systémovou protinádorovou odpověď. Calreticulin, protein uvolňovaný během imunogenní buněčné smrti, je v současnosti studován jako cíl po protinádorovou imunoterapii díky svým imunostimulačním vlastnostem a schopnosti podpořit fagocytózu nádorových buněk. Tato diplomová práce se zaměřuje na hodnocení účinnosti calretikulinu jako adjuvans v rámci intratumorální imunoterapie, a to jak při samostatném podání, tak v kombinaci s agonisty TLR. Během experimentů byly použity dva myší nádorové modely: málo imunogenní melanom B16-F10 a více imunogenní kolorektálním karcinom MC38. Výsledky ukázaly, že samotný calretikulin nevykazuje signifikantní terapeutický efekt v žádném z těchto modelů. Naproti tomu jeho kombinace s TLR agonisty vedla k prodloužení celkového přežití, zpomalení růstu nádoru a u myší s MC38 nádory k trendu zvýšené infiltrace dendritickými buňkami a CD8+ T lymfocyty v nádorovém mikroprostředí. Taky byly pozorovány známky systémové, dlouhodobé a nádorově specifické adaptivní imunitní odpovědi. Získané výsledky naznačují, že calretikulin má potenciál sloužit jako efektivní adjuvans v...