Charakteristika potomků buněčných linií exprimujících Sonic hedgehog detekovaných v srdeční tkáni

Abstract

Sonic hedgehog gene is one of the three Hedgehog family genes. In humans it is located on Chromosome 7 and in mice it is located on Chromosome 5. It encodes a protein that also serves as a signaling molecule. Shh plays a key role in forming structure in early embryos. It is essential for ventral neural tube patterning, the establishment of the anterior-posterior limb axis and ventral somites. It is proven that Shh affects the development of the cardiac outflow track and atrial structures. This work builds on study that discovered that the population of Shh-descendant cells, it means the cells which have expressed Shh previously, have been found within the ventricular myocardium. The main thought of this thesis is to characterise Shh-descendant cells in cardiac tissue, both prenatally and postnatally. To achieve this, the RNA scope and immunohistochemical methods were applied. During development, Shh-descendant cells in both the ventricles and atria exhibited SMA expression. These cells also expressed Gja5, a marker of gap junctions participating in the formation of intercalated discs expressed typically in the cardiomyocytes of cardiac conduction system. These findings support the conclusion that Shh-descendant cells in the heart are differentiating cardiomyocytes. In postnatal specimens,...

Sonic hedgehog je jedním ze tří genů patřící do rodiny Hedgehog. Tento gen, nacházející se u lidí na chromozomu 7 a u myší na chromozomu 5, kóduje protein plnící rovněž funkci signální molekuly. Shh hraje klíčovou roli ve formování struktury raného embrya. Je nezbytný k diferenciaci buněk ventrální neurální trubice, formování předozadní osy končetin i ventrálních somitů. Již bylo potvrzeno, že v srdci hraje Shh roli při vývoji výtokového traktu a síní. Tato práce navazuje na studii, při níž bylo zjištěno, že populace Shh descendentních buněk neboli buněk, které ve své minulosti exprimovaly Shh, se vyskytuje i v myokardu komor. Cílem této diplomové práce bylo charakterizovat Shh descendentní buňky nacházející se v srdeční tkáni, a to jak prenatálně, tak i postnatálně. K tomu byly využity metody RNA scope a imunohistochemie. V průběhu vývoje se nám v Shh descendentních buňkách komor i síní podařilo detekovat expresi SMA. Tyto buňky rovněž vykazovaly expresi Gja5, tedy markeru gap junctions participujících na vzniku interkalárních disků, který je typicky exprimován také v kardiomyocytech převodního systému srdečního. Z toho lze uzavřít, že Shh descendentní buňky v srdci jsou diferencující kardiomyocyty. Následně bylo u postnatálních jedinců potvrzeno, že Shh descendentní buňky exprimují marker...