Role WNT signalizace ve fibroblastech mléčné žlázy: vliv na proliferaci, migraci a interakce s epitelem

Abstract

WNT signaling plays a crucial role in regulating many cellular processes, including proliferation, migration, and interactions between various cell types. Mammary gland fibroblasts, as a fundamental component of the stroma, significantly contribute to the regulation of epithelial development and function through signaling pathways and extracellular matrix remodeling. However, the specific role of WNT signaling in mammary gland fibroblasts remains insufficiently explored. The aim of this thesis was to characterize the role of WNT signaling in mammary gland fibroblasts, with a focus on its influence on cell proliferation, migration, and epithelialstromal interactions. In vitro experiments were conducted to assess fibroblast proliferation and migration under 2D culture conditions with modulated WNT signaling. Furthermore, 3D co-culture systems of epithelial organoids and fibroblasts were used to investigate the effects of WNT signaling on cellular communication. In addition, in vivo analysis of mammary gland morphogenesis was performed following pharmacological inhibition of WNT signaling. The results demonstrate that WNT signaling significantly affects both proliferation and migration of fibroblasts-activation of the pathway increases proliferation but paradoxically reduces migratory capacity,...

WNT signalizace hraje klíčovou roli v regulaci mnoha buněčných procesů, včetně proliferace, migrace a interakcí mezi různými buněčnými typy. Fibroblasty mléčné žlázy, jako základní složka stromatu, významně přispívají k regulaci vývoje a funkce epitelu mléčné žlázy prostřednictvím signalizace a remodelace extracelulární matrix. Role WNT signalizace ve fibroblastech mléčné žlázy však dosud nebyla dostatečně prozkoumána. Cílem této diplomové práce bylo charakterizovat roli WNT signalizace ve fibroblastech mléčné žlázy se zaměřením na její vliv na buněčnou proliferaci, migraci a epitelovo-stromální interakce. V rámci in vitro experimentů byla analyzována proliferace a migrace fibroblastů v podmínkách 2D kultury při modulaci WNT signalizace. Pomocí 3D kokultur epitelových organoidů s fibroblasty byl dále zkoumán vliv této signalizace na vzájemnou komunikaci mezi oběma buněčnými typy. Součástí práce byla i in vivo analýza morfogeneze mléčné žlázy po farmakologické inhibici WNT signalizace. Získané výsledky ukazují, že WNT signalizace významně ovlivňuje proliferaci i migraci fibroblastů - její aktivace zvyšuje proliferaci, ale paradoxně snižuje migrační schopnosti, zatímco inhibice vede ke snížení obou parametrů. Tyto efekty poukazují na nutnost přesné regulace WNT aktivity pro zachování rovnováhy mezi...