Vývoj metod stanovení 7α-hydroxycholesterolu v nadbytku cholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě

Abstract

This bachelor's thesis was aimed at development of a method of determination of 7α-hydroxycholesterol in a mixture containing cholesterol in excess on boron doped diamond electrode. The substances were studied separately at first. Afterwards, the determination of 7α-hydroxycholesterol in two larger concentrations of cholesterol was studied as well. Two voltammetric methods were tested: cyclic voltammetry and differential pulse voltammetry, the latter one providing better results. 7α-hydroxycholesterol provided a current response around +800 mV vs. non-aqueous Ag/Ag+ electrode in the presence of 0,1 mol L-1 HClO4 in acetonitrile containing 1% of water. The proposed differential pulse voltammetry method provided sufficient measurement repeatability. The concentration dependence of 7α-hydroxycholesterol in the excess of cholesterol in two concentrations, 1·10−4 mol L−1 and 5·10−4 mol L−1 , was also measured. These two concentration dependences were compared to the concentration dependence of 7α-hydroxycholesterol in the absence of cholesterol. The results indicated that the more cholesterol there is in the solution, the lower is the current response of 7α-hydroxycholesterol. The exact character of this phenomenon must be explained by further research. The limits of detection (LOD) and limits of...

Tato bakalářská práce se zabývala vývojem voltametrické metody stanovení 7α-hydroxycholesterolu ve směsi obsahující nadbytek cholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě. Bylo studováno chování obou látek zvlášť a dále chování 7α-hydroxycholesterolu ve dvou vyšších koncentracích cholesterolu. K tomu bylo využito cyklické voltametrie a diferenční pulzní voltametrie, přičemž druhá zmíněná metoda se ukázala být vhodnější. 7α-hydroxycholesterol poskytuje samotný i v přítomnosti cholesterolu pík okolo +800 mV vs. nevodná referenční Ag/Ag+ elektroda při použití 0,1 mol l-1 HClO4 v acetonitrilu s obsahem 1 % vody jako základního elektrolytu. Pro navrženou metodu diferenční pulzní voltametrie byla zjištěna dobrá opakovatelnost výsledků měření. Taktéž byly naměřeny koncentrační závislosti 7α-hydroxycholesterolu v nadbytku cholesterolu o koncentracích 1·10−4 mol.l−1 a 5·10−4 mol.l−1 , které byly porovnány s koncentrační závislostí samotného 7α-hydroxycholesterolu. Ukázalo se, že 7α-hydroxycholesterol poskytuje nižší proudovou odezvu, čím vyšší je koncentrace cholesterolu v roztoku. Přesný charakter tohoto jevu je však nutno potvrdit dalším výzkumem. Taktéž byly zjištěny limity detekce (LOD) a limity kvantifikace (LOQ) obou koncentračních závislostí. Pro 7α-hydroxycholesterol v 1·10−4 mol.l−1...