Nepřímé metody detekce HPV-specifických protilátek

Abstract

This bachelor's thesis dealt with indirect methods for detecting antibodies specific to early human papillomavirus (HPV) proteins. HPVs are most commonly transmitted sexually and cause a variety of benign and malignant diseases. Detection of antibodies to the pathogen, rather than detection of the pathogen itself or parts of the pathogen, is the essence of the diagnostic approach called serology. The detection of HPV-specific antibodies is important in cancer patients with HPV-associated tumours that do not show precancerous stages, and the first diagnosis reveals an already developed tumour. GST-ELISA and Luminex are the most commonly used serological methods. Both of these methods use recombinant antigens to capture antibodies and subsequent immunochemical detection of the captured antibodies. For the diagnosis of HPV-associated cancers, the use of serological detection of antibodies to early HPV viral proteins directly involved in the process of carcinogenesis is proposed. The data published so far show that detection of HPV-specific antibodies against more than one antigen will be necessary to detect at-risk patients with sufficient sensitivity. The aim of the practical part of my work was to prepare antigens for the detection of HPV-specific antibodies and to verify their functionality on...

Tato bakalářská práce se zabývala nepřímými metodami detekce protilátek specifických vůči časným proteinům lidských papilomavirů (HPV). HPV se přenáší nejčastěji pohlavně a způsobují řadu benigních i maligních onemocnění. Detekce protilátek vůči patogenu, namísto detekce samotného patogenu nebo jeho částí, je podstatou diagnostického přístupu zvaného sérologie. Detekce HPV-specifických protilátek má význam u onkologických pacientů s HPV-asociovanými nádory, které nevykazují prekancerózní stádia a první diagnostika odhalí již rozvinutý nádor. Nejčastěji využívanými metodami sérologických stanovení jsou GST-ELISA a Luminex. Obě tyto metody využívají rekombinantní antigeny pro zachycení protilátek a následnou imunochemickou detekci zachycených protilátek. Pro diagnostiku HPV-asociovaných nádorových onemocnění se navrhuje využití sérologické detekce protilátek vůči časným virovým proteinům HPV, které se do procesu karcinogeneze přímo zapojují. Dosud publikovaná data ukazují, že k dostatečné citlivosti záchytu rizikových pacientů bude třeba detekovat HPV-specifické protilátky proti více než jednomu antigenu. Cílem praktické části mé práce bylo připravit antigeny pro detekci HPV-specifických protilátek a ověřit jejich funkčnost na kontrolních sérech pacientů s nádory hlavy a krku. Klíčová slova: časný...