Vývoj LC-UV metody vhodné ke sledování uvolňování rebamipidu během disolučního testování

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývala vývojem vhodné LC-UV metody ke sledování uvolňování účinné látky rebamipidu z tabletové lékové formy. Metoda byla vyvíjena na ultra-vysokoúčinném kapalinovém chromatografu se spektrofotometrickým detektorem s diodovým polem. Byla použita kolona s povrchově porézními částicemi InfinityLab Poroshell HPH-C18 s velikostí částic 2,7 µm. Mobilní fáze byla složena z vodné složky NH4H2PO4 (pH 2,5) a organické složky CH3CN. Byly nastaveny další optimální chromatografické podmínky: objem nástřiku vzorku 1 μl, průtok mobilní fáze 0,800 ml min−1 za gradientové eluce, teplota kolony 40 C, detekce při vlnové délce 326 nm s referencí 380 nm, doba celkové analýzy 8 min. Metoda byla částečně validována s mezí detekce, mezí stanovitelnosti, s přesností a správností. Hodnota meze detekce byla 3,8 · 10−4 mg ml−1 , meze stanovitelnosti 1,27 · 10−3 mg ml−1 . Správnost metody byla vyjádřena pomocí relativní chyby v rozmezí 0,65-5,46 % a přesnost metody byla stanovena prostřednictvím směrodatné odchylky v rozmezí 0,83-6,78 %. Metoda bude mít využití v kvantifikaci uvolněné účinné látky rebamipidu z inovativních tabletových forem během disolučního testování. Klíčová slova Rebamipid, RP-UHPLC, DAD

This bachelor's thesis deals with the development of a suitable LC-UV method for monitoring of the release of rebamipide from tablet dosage form. The method was developed using ultra-high performance liquid chromatography and a spectrophotometric detector DAD. For the experiment a core-shell column InfinityLab HPH-C18 with a particle size of 2,7 µm was used. Mobile phase consisted of water solvent NH4H2PO4 (pH 2,5) and organic solvent CH3CN. Other optimal chromatographic conditions were set: sample injection volume 1 μl, flow rate of mobile phase 0,800 ml min−1 during gradient elution mode, column temperature 40 C, detection wavelength of 326 nm with a reference at 380 nm and a time of analysis 8 min. The method was validated for limit of detection, limit of quantitation, precision and accuracy. The value of detection limit was 3,8 · 10−4 mg ml−1 and limit of quantification was 1,27 · 10−3 mg ml−1 . Accuracy was determined using relative error ranging from 0,65 % to 5,46 % and precision was determined using relative standard deviation in the range, 0,83-6,78 %. The method will be used to quantify the released of an active pharmaceutical ingredient rebamipide from an innovative tablet dosage form during dissolution testing. Keywords Rebamipide, RP-UHPLC, DAD