Strukturní biochemie NK buněčného receptoru NKp30

Abstract

Natural killer cells (NK cells) play an important role in protecting the organism from threats, that are recognized through surface receptors. This thesis focuses on the receptor NKp30, which can elicit a cytotoxic response from these cells upon binding its ligand molecule, B7-H6. The soluble form of NKp30 forms oligomers, and this behavior is thought to be involved in signal transduction into the cell from the membrane-bound form of NKp30. The aims of this work are to design and test B7-H6-based fluorescent probes for visualization of NKp30 on the cell surface, to prepare monomeric constructs of this receptor as well as plasmid libraries for preparation of cell lines carrying various variants of NKp30 with different glycosylation. The final goal is to use the obtained material to observe the oligomerization of the receptor directly on the cellular membrane using the super-resolution method DNA-PAINT. KEY WORDS NK cells, NKp30, B7-H6, DNA-PAINT

Přirozeně zabijácké buňky (NK buňky) hrají důležitou roli při ochraně organismu před hrozbami, které rozeznávají svými povrchovými receptory. Tato práce se věnuje receptoru NKp30, který po vazbě ligandu B7-H6 dokáže vyvolat cytotoxickou odpověď těchto buněk. Receptor NKp30 v solubilní formě vytváří oligomery a předpokládá se, že tento jev se u membránově vázané formy receptoru účastní přenosu signálu do buňky. Náplní této práce je návrh a testování fluorescenčních sond na bázi B7-H6 pro vizualizaci NKp30 na povrchu buněk, příprava monomerních konstruktů tohoto receptoru a rovněž plasmidových knihoven pro tvorbu buněčných linií nesoucích různě glykosylované varianty NKp30. Finálním cílem je pak sledování oligomerizace receptoru přímo na buněčné membráně pomocí superrozlišovací metody DNA-PAINT s využitím připraveného materiálu. KLÍČOVÁ SLOVA NK buňky, NKp30, B7-H6, DNA-PAINT