Vývoj LC-MS/MS metody pro současné stanovení melperonu a tiapridu v lidském séru a dialyzátu

Abstract

The aim of this diploma thesis was to develop an LC-MS/MS method for the simultaneous determination of melperone and tiapride in human blood serum and dialysate in order to understand the pharmacokinetics of both compounds in patients undergoing hemodialysis. In this diploma thesis the mass spectrometer and high-performance liquid chromatography method were optimized. The optimal parameters were as follows: chromatographic column Zorbax SB-Aq 150 × 2,1 mm, 1,8 μm from Agilent Technologies (USA). The mobile phase contained 0,1% formic acid as aqueous component (component A) and acetonitrile with 0,1% formic acid as organic component (component B), the flow rate of mobile phase was 0,45 ml/min, the column temperature 40 řC, the temperature in an autosampler 15 řC. The sample injection volume was 1 μl. The analysis time was 10 minutes under gradient elution conditions (time: 0,0-1,0-5,0- 6,0-7,0-10,0 min, A: 90-90-10-10-90-90 % v/v). The following MRM transitions in positive mode of highest intensity were monitored: melperone: 264,1 → 165,1 (Q1 = -30,0 V, CE = -20,0 V, Q3 = -17,0 V), melperone D4: 268,3 → 169,2 (Q1 = -14,0 V, CE = -21,0 V, Q3 = -18,0 V), tiapride: 329,4 → 256,2 (Q1 = -10,0 V, CE = -22,0 V, Q3 = -27,0 V) and sultopride: 355,4 → 112,2 (Q1 = -18,0 V, CE = -28,0 V, Q3 = -21,0 V). Under...

Cílem této diplomové práce bylo vyvinout LC-MS/MS metodu vhodnou k současnému stanovení melperonu a tiapridu v lidském krevním séru a dialyzátu za účelem pochopení farmakokinetiky obou látek u pacientů podstupujících hemodialýzu. V rámci této diplomové práce byla provedena optimalizace hmotnostního spektrometru a vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Zjištěné optimální parametry byly následující: chromatografická kolona Zorbax SB-Aq 150 × 2,1 mm, 1,8 μm od společnosti Agilent Technologies (USA). Mobilní fáze obsahovala jako vodnou složku 0,1% kyselinu mravenčí (složka A) a jako organickou složku acetonitril okyselený 0,1% kyselinou mravenčí (složka B), průtok mobilní fáze byl 0,45 ml/min, teplota kolony byla 40 řC a teplota na dávkovači byla 15 řC. Nastřikovaný objem vzorku na kolonu byl 1 μl. Doba analýzy byla 10 minut za podmínek gradientové eluce (čas: 0,0-1,0-5,0-6,0-7,0- 10,0 min, A: 90-90-10-10-90-90 % v/v). Sledované MRM přechody v pozitivním módu o nejvyšších intenzitách byly následující: melperon: 264,1 → 165,1 (Q1 = -30,0 V, CE = -20,0 V, Q3 = -17,0 V), melperon D4: 268,3 → 169,2 (Q1 = -14,0 V, CE = -21,0 V, Q3 = -18,0 V), tiaprid: 329,4 → 256,2 (Q1 = -10,0 V, CE = -22,0 V, Q3 = -27,0 V) a sultoprid: 355,4 → 112,2 (Q1 = -18,0 V, CE = -28,0 V, Q3 = -21,0 V). Za optimalizovaných LC-MS/MS...