Diferenciační potenciál lidských Sertoliho buněk in vitro

Abstract

Mezenchymální kmenové buňky (MSCs) jsou již delší dobu zkoumány pro svůj diferenciační a imunoregulační potenciál. Bylo zjištěno, že Sertoliho buňky (SCs) sdílejí některé vlastnosti MSCs, což z nich rovněž činí zajímavý objekt výzkumu. V Laboratořích vývojové biologie a imunoregulací Přírodovědecké fakulty UK byly prokázány významné imunomodulační schopnosti SCs izolovaných z juvenilního samce myši a byl prokázán jejich multipotentní diferenciační potenciál. Tato práce se zaměřuje na izolaci, kultivaci a charakterizaci lidských Sertoliho buněk (hSCs) a zkoumá jejich diferenciační potenciál in vitro. Poté, co byl optimalizován protokol izolace, byly založeny primární kultury hSCs izolovaných z biopsií varlat tří pacientů kliniky GENNET. Imunofluorescenční barvení potvrdilo expresi genů specifických pro SCs a zároveň vyloučilo přítomnost zárodečných buněk v jednotlivých kulturách. Na základě expresního profilu hSCs byl potvrzen somatický původ buněk a byla prokázána exprese genů specifických pro SCs a genů typických pro MSCs. V buněčných kulturách hSCs a MSCs byla úspěšně indukována chondrogenní diferenciace. Indukce adipogenní a osteogenní diferenciace nebyla prokázána. Z výsledků této studie lze usuzovat, že hSCs pravděpodobně nejsou terminálně diferencované buňky, mají chondrogenní diferenciační...

Mesenchymal stem cells (MSCs) have long been studied for their differentiation and immunoregulatory potential. Sertoli cells (SCs) have been found to share some of the characteristics of MSCs, making them an interesting target for research. In the Developmental Biology and Immunoregulation Laboratories of the Faculty of Science CU, SCs isolated from juvenile male mice have been shown to have significant immunomodulatory capabilities and their multipotent differentiation potential has been demonstrated. This work focuses on the isolation, culture and characterisation of human Sertoli cells (hSCs) and investigates their differentiation potential in vitro. After optimisation of the isolation protocol, primary cultures of hSCs isolated from testicular biopsies of three GENNET clinic patients were established. Immunofluorescence staining confirmed the expression of SC-specific genes while excluding the presence of germ cells in each culture. The expression profile of hSCs confirmed the somatic origin of the cells and demonstrated the expression of SC-specific genes and genes typical for MSCs. Chondrogenic differentiation was successfully induced in cell cultures of hSCs and MSCs. Induction of adipogenic and osteogenic differentiation was not demonstrated. The results of this study suggest that hSCs are...