Syntéza, charakterizace a studium vlastností funkčních konjugátů protilátek

Abstract

Radioimmunotherapy combines biological treatment with the use of highly effective radioactive radiation, which allows for more effective and gentle cancer therapy. This bachelor thesis focuses on the use of the therapeutic radioisotope 161Tb, which is characterized by the emission of low-energy electrons and gamma rays that allow monitoring of therapy and targeting of cancer cells, metastases and whole tumors. This theranostic approach offers increased treatment efficacy, especially in the early stages of the disease. This thesis focuses on a model study of rituximab monoclonal antibody conjugates that have been fluorescently labelled using a fluorescein tag. Covalent binding between the immunotherapeutic conjugate and the fluorescent label was accomplished using free amino groups of lysines and bioorthogonal chemistry. A biologically active antibody conjugate with a fluorescent label was developed that allowed direct monitoring of the conjugate binding to CD20-expressing cells using confocal microscopy. Subsequently, a radioactive conjugate of rituximab, modified with the p-SCN-Bn-CHX-A"-DTPA chelator and radiolabeled with the 161 Tb radioisotope, was tested. The biological activity of the radioimmunoconjugate was determined by in vitro experiments. Biodistribution of the radioimmunoconjugate was...

Radioimunoterapie spojuje biologickou léčbu s využitím vysoce účinného radioaktivního záření, což umožňuje efektivnější a šetrnější terapii nádorových onemocnění. Tato bakalářská práce se zaměřuje na využití terapeutického radioizotopu 161 Tb, který se vyznačuje emisí nízkoenergetických elektronů a gama záření umožňující monitorování terapie a cílení na nádorové buňky, metastázy a celé nádory. Tento teranostický přístup nabízí zvýšenou účinnost léčby, zejména v raných stádiích onemocnění. Práce se zabývá modelovou studií konjugátů monoklonální protilátky rituximab, které byly fluorescenčně označeny za použití fluoresceinové značky. Kovalentní vazba mezi imunoterapeutickým konjugátem a fluorescenční značkou byla realizována za využití volných aminoskupin lysinů a pomocí bioortogonální chemie. Byl vyvinut biologicky aktivní konjugát protilátky s fluorescenční značkou, který umožnil přímé sledování vazby konjugátu na buňky s expresí CD20 pomocí konfokálního mikroskopu. Následně byl testován radioaktivní konjugát rituximabu, modifikovaný chelátorem p-SCN-Bn-CHX-A"-DTPA, označený radioizotopem 161 Tb. Biologická aktivita radioimunokonjugátu byla stanovena pomocí in vitro experimentů. Biodistribuce radioimunokonjugátu byla sledována po intravenózním podání, přičemž in vivo testy prokázaly retenci látky v...