Využitie ultra-vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie pre súčasné stanovenie: paracetamolu, amoxicilínu a doxycyklínu

Abstract

V tejto práci bola vyvíjaná metóda pre súčasné stanovenie troch liečivých látok - amoxicilínu, doxycyklínu a paracetamolu. K rozdeleniu bola zvolená metóda ultra-vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Ako stacionárna fáza bola použitá kolóna Kinetex C18 s rozmermi 100×2,1 mm a veľkosťou častíc 1,7 μm. Optimálna metóda prebiehala v gradientovom móde s celkovým časom analýzy 5 minút. Ako mobilná fáza bola použitá zmes zložky A, ktorá obsahovala acetonitril s prídavkom 0,1 % mravčej kyseliny a zložky B, ktorá pozostávala z deionizovanej vody s prídavkom 0,1 % mravčej kyseliny. Podmienky v kolóne sa v priebehu separácie menili podľa nasledujúceho gradientového programu: 0 - 1,0 min: 10 % A (obj.%); 1,0 - 1,5min: 10 % → 65 % A (obj. %); 1,5 - 2,0 min: 65 % A (obj. %); 2,0 - 2,5 min 65 % → 10 % A (obj. %); 2,5 - 5,0 min 10 % A (obj. %). Hodnota pH mobilnej fázy bola 2,8. Prietok bol nastavený na 0,3 ml/min, teplota kolóny bola 25 řC a teplota v autosampleri bola po celý čas analýzy udržiavaná na 8 řC. Objem jednotlivých nástrekov bol 1 μl a analyty boli detegované detektorom s diódovým poľom. Detekcia prebiehala pri vlnovej dĺžke 245 nm. Identifikácia liečiv prebehla použitím QDA detektoru, ktorý bol nastavený na pozitívny mód s hmotnostným rozsahom od 100,00 do 500,00 Da. Metóda bola čiastočne...

In this study, a method was developed for the simultaneous determination of three pharmaceutical compounds: amoxicillin, doxycycline, and paracetamol. Ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC) was employed for the separation. A Kinetex column C18 measuring 100×2,1 mm with a particle size of 1,7 μm was used as the stationary phase. The optimal method was run in gradient mode with a total analysis time of 5 minutes. The mobile phase consisted of a mixture of component A, containing acetonitrile with 0,1% formic acid, and component B, comprising deionized water with 0,1% formic acid. The separation conditions in the column varied according to the following gradient program: 0 - 1,0 min: 10% A (v/v); 1,0 - 1,5 min: 10% → 65% A (v/v); 1,5 - 2,0 min: 65% A (v/v); 2,0 - 2,5 min 65%→10% A (v/v); 2,5 - 5,0 min 10% A (v/v). The pH of the mobile phase was maintained at 2,8. The flow rate was set at 0,3 ml/min, column temperature was maintained at 25řC, and the autosampler temperature was consistently held at 8řC. The injection volume was 1 μl, and analytes were detected using a diode array detector at a wavelength of 245 nm. Drug identification was conducted using a QDA detector set to positive mode with a mass range from 100,00 to 500,00 Da. The method was partially validated by constructing a...