Vliv estrogenů na in vitro modely testikulární tkáně a spermatogeneze

Abstract

Although estrogens are primarily known for their functions in female reproductive system, their effect on male reproductive functions has also been well established. Physiological estrogen concentration is essential for a proper spermatogenesis. Estrogens regulate many functions in testicular tissue, including proliferation and apoptosis of all testicular cell types, dynamic restructuring of cell-cell junctions in the testis, and post-translation modifications of histones. Hence, the aim of this thesis was to study effect of estrogens on in vitro models of testicular tissue and spermatogenesis and thus to address their functions in testicular tissue more deeply. This project includes testicular organoid cultivation for further usage as in vitro model of spermatogenesis. To addresss the effect of various avaliable estrogen forms, experiments on MCF-7 cell line were done. Finally experiments with in vitro model of testicullar tissue - TM4 Sertoli cell line were done. In order to fulfill the aims and verify the hypotheses, some advanced methods such as CLARITY volume confocal imaging and holographic microscopy were used. It was found that estrogens can affect Sertoli cell morphology and the expression of some genes involved in cell-cell junction dynamics. Furthermore the process of spermatogenesis was...

Přestože jsou estrogeny známy především pro jejich funkce v ženském reprodukčním systému, jejich vliv na mužské reprodukční funkce byl již také vcelku dobře objasněn. Fyziologické koncentrace estrogenů jsou esenciální pro správný průběh spermatogeneze. Regulují celou řadu funkcí v testikulární tkáni, včetně proliferace a apoptózy všech typů testikulárních buněk, dynamické restrukturalizace mezibuněčných spojení v testes a změn v zastoupení některých post-translačních modifikací histonů v jádrech testikulárních buněk. Cílem této diplomové práce bylo studovat jejich vliv na in vitro modely testikulární tkáně a spermatogeneze a tak hlouběji objasnit jejich funkce v testikulární tkáni. Součástí tohoto projektu bylo také ustanovení in vitro kultury testikulárních organoidů pro pozdější použití jako in vitro model spermatogeneze. Současně byly provedeny experimenty s MCF7 buněčnou liní, které byly použity k výběru vhodné formy estrogenu pro experimenty. Nakonec byly provedeny experimenty s TM4 buněčnou linií, která sloužila jako in vitro model testikulární tkáně. V rámci plnění cílů a ověřování stanovených hypotéz byly použity i některé pokročilejší metody jako například objemové konfokální zobrazování CLARITY či holografická mikroskopie. Bylo zjištěno, že estrogeny mají vliv na morfologii Sertoliho...