Vliv epikardu na regeneraci srdce po cryoinjury v průběhu embryonálního vývoje - analýza morfologických a fyziologických změn

Abstract

Millions of people die from myocardial infarction every year. In the heart, damaged cardiomyocytes do not regenerate and fibrotic scar forms. Surface layer of the heart - epicardium, improve heart regeneration processes by producing signalling factors. Epicardial cells undergo epithelial-mesenchymal transition and give rise to various cells involved in heart regeneration (coronary vessel formation and possibly new cardiomyocytes). To study the effect of epicardium on cardiac regeneration, I introduced a novel method of myocardial cryoinjury in avian embryos. In embryonic stages, where the heart is already covered by a layer of epicardium. Probe cooled in liquid nitrogen, injured the left ventricle of the heart and simulate myocardial infarction. Cryoinjury is an appropriate alternative to induce myocardial infarction as the coronary ligation is not feasible in early embryos. After cryoinjury, were observed changes in the epicardium. Epicardium is activated (expression of WT1) and detached from myocardium and form protrusions. In subepicardium we observed a large number of migrating cells. These cells undergo epithelial-mesenchymal transition were detected by cytokeratin and vimentin antibodies. We observed α-SMA positive cells and undifferentiated cardiomyocytes (N2.261 antibody) in the...

Na infarkt myokardu ročně umírají miliony osob. V srdci následkem ischémie nedochází k dostatečnému nahrazení poškozených kardiomyocytů, vytváří se fibrotická jizva a srdce ztrácí schopnost pumpy. Vrstva buněk, která produkuje množství signalizačních faktorů a vzniká z ní řada buněk, které by mohli napomoci regeneraci po poškození, se nazývá epikard. Jedná se o zevní vrstvu srdeční stěny, jejíž buňky podstupují epiteliálně-mezenchymální tranzici za vzniku buněk účastnících se mimo jiné i formace koronárních cév a pravděpodobně i nových kardiomyocytů. Pro studium vlivu epikardu na regeneraci srdce jsem zavedla novou metodu myokardiálního cryoinjury na ptačích stádiích embryí, kdy je srdce již pokryto vrstvou epikardu a ovlivňuje tak samotnou regeneraci. Pomocí sondy zchlazené v tekutém dusíku bylo indukováno poškození levé komory srdeční, simulující infarkt myokardu. Jedná se o vhodnou alternativu například k podvazům koronárních cév, které u takto raných embryí nejsou proveditelné. Následkem cryoinjury byly pozorovány razantní změny na úrovni epikardu. V této vrstvě byla následkem cryoinjury aktivována exprese (WT1), což se projevovalo odchlípnutím epikardu, zvlněním a tvorbou neobvyklých výběžků. Tím se zvětšila i oblast subepikardu, ve které jsme zaznamenali velké množství migrujících buněk....