Modulation of the STING signaling pathway

Abstract

cGAS-STING signální dráha hraje klíčovou roli v imunitní obraně hostitele proti různým patologiím včetně autoimunitních a autozánětlivých onemocnění, rakoviny, senescenci a patogenních infekcí, a to jak bakteriálních, tak virových (např. virus hepatitidy B (HBV)). Infekce virem HBV může vyústit buď v akutní či chronickou formu (CHB) s širokým rozsahem imunitních invazivních mechanismů vedoucích až k jaterní cirhóze, steatóze nebo hepatocelulárnímu karcinomu. V současné době jsou schváleny dvě CHB terapie, z nichž obě zřídka vedou k úplnému vyléčení a často vyžadují celoživotní aplikaci. Vývoj a validace nových CHB terapeutik závisí na výběru vhodného in vivo modelu. Hlavním cílem této práce bylo vyvinout CHB myší model vhodný pro robustní preklinické testování nových terapeutik založený na hydrodynamické injekci. Byly porovnávány dva transportní systémy, adeno-asociovaný plazmidový vektor (pAAV) a minikruhový konstrukt kódující HBV genomy dvou genotypů (A nebo D) se zavedenou bodovou mutací ve START kodonu polymerázy u dvou imunokompetentních myších kmenů, C57Bl/6 a C3H/HeN. Přetrvávající exprese virových antigenů byla pozorována pouze u myšího kmene C3H/HeN při použití pAAV konstruktu kódujícího HBV genom genotypu A se zavedenou bodovou mutací T2308C ve START kodonu polymerázy bránící tvorbě...

cGAS-STING signalling pathway plays the key role in the host immune defence in diverse pathologies including, autoimmune and autoinflammatory diseases, cancer, senescence and ageing, pathogen infection, i.e., bacterial, viral infection, such as hepatitis B (HBV). HBV infection can result in either an acute or a chronic type (CHB), both of wide range of immune invading mechanism potentially leading to liver cirrhosis, steatosis, or hepatocellular carcinoma. Currently, two available CHB therapies are approved, both of which rarely result in the complete cure and often require life-long application. The development and validation of novel CHB therapeutics relies on suitable CHB animal models. The main goal of this thesis was to develop a mouse model reflecting CHB based on hydrodynamic injection suitable for robust preclinical testing of novel CHB therapeutics. Two delivery systems were compared, adeno-associated plasmid vector (pAAV) and minicircle construct, encoding HBV genomes of two genotypes (A or D) with introduced point mutation in the START codon of the polymerase in two immunocompetent mouse strains, C57Bl/6 and C3H/HeN. Persisting expression of viral antigens was observed only in the C3H/HeN mice when using pAAV construct encoding HBV genome of genotype A with introduced T2308C point...