Produkce a charakterizace mutované formy galektinu-3
Production and characterization of galectin-3 mutant
bakalářská práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/176959Identifikátory
SIS: 242896
Kolekce
- Kvalifikační práce [19109]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Ječmen, Tomáš
Fakulta / součást
Přírodovědecká fakulta
Obor
Biochemie
Katedra / ústav / klinika
Katedra biochemie
Datum obhajoby
15. 9. 2022
Nakladatel
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaJazyk
Čeština
Známka
Výborně
Klíčová slova (česky)
Galektin-3, NKp30, NK buňky, rekombinantní exprese proteinů, E. coli, kapalinová chromatografieKlíčová slova (anglicky)
Galectin-3, NKp30, NK cells, recombinant protein expression, E. coli, liquid chromatographyPřirozeně zabijácké buňky (NK buňky, z angl. natural killer) jsou velké granulární lymfocyty vrozené imunity, které jsou charakterizovány schopností zabíjet rakovinné a virem poškozené buňky bez předchozí aktivace. Cytotoxické funkce NK buněk jsou regulovány jednak prostřednictvím povrchových receptorů rozpoznávajících molekuly MHC-I, jednak přítomností sady aktivačních a inhibičních receptorů, které jsou mezi sebou za normálních podmínek v rovnováze. Osud cílové buňky proto záleží nejen na expresi MHC-I, ale i na expresi ligandů aktivujících receptory NK buněk. Jedním z aktivačních receptorů NK buněk je NKp30. Pro NKp30 byly objeveny tři specifické buněčné ligandy: lidský athanogen 6 asociovaný s BCL-2 (BAG-6, také známý jako BAT3), nádorový antigen B7-H6 a nově objevený ligand galektin-3. Všechny tyto ligandy jsou často exprimovány rakovinnými buňkami, přičemž BAG-6 a Gal-3 působí na funkce NK buněk inhibičně, což může být mechanismem úniku nádoru před imunitním systémem. Proto je Gal-3 novým potenciálním cílem léků, které inhibicí Gal-3 mohou napomáhat imunitnímu systému bránit se proti maligně transformovaným buňkám. Tato bakalářská práce zahrnuje ověření vlivu mutace Cys173 - Ser173 v sacharid vazebné doméně galektinu-3 na vazbu receptoru NKp30 pomocí gelové permeační chromatografie. Dále se...
Natural killer cells are large granular lymphocytes of innate immunity that are characterized by the ability to kill cancer and virus-damaged cells without prior activation. Cytotoxic functions of NK cells are regulated on the one hand through surface receptors recognizing MHC-I molecules, on the other hand by the presence of a set of activating and inhibitory receptors that are under normal conditions in balance with each other. Therefore, the fate of the target cell depends not only on the expression of MHC-I, but also on the expression of ligands that activate NK cell receptors. One of the activating receptors of NK cells is NKp30. Three specific cellular ligands have been discovered for NKp30: human BCL-2-associated athanogen 6 (BAG-6, also known as BAT3), tumour antigen B7-H6, and the newly discovered ligand galectin-3. All these ligands are often expressed by cancer cells, where BAG-6 and Gal-3 inhibit NK cell functions, which may be a mechanism for tumour escape from the immune system. Therefore, Gal-3 is a new potential drug target that, by inhibiting Gal-3, can help the immune system defend itself against malignantly transformed cells. This bachelor's thesis includes the verification of the effect of the Cys173 - Ser173 mutation in the carbohydrate recognition domain of galectin-3 on the...