Mapování buněčné populace exprimující Sonic hedgehog při embryonálním vývoji srdce

Abstract

Sonic hedgehog is one of three members of the Hedgehog family, whose signaling pathway plays a crucial role in controlling the development of vertebrates. Sonic hedgehog has an important role in organizing the developmental processes of majority of organ systems. Interestingly, its direct expression or a contribution of cell lineages expressing this signaling molecule in the myocardium has never been described. The aim of this work was to try to detect the cells that expressed Sonic hedgehog directly in the heart tissue with a focus on the myocardium. We monitored these cells from embryonic day 10.5 to 16.5 and then postnatally. We also evaluated current Sonic hedgehog expression in cardiac tissue from embryonic day 12.5 to embryonic day 15.5. We used the CreLoxP system, X-gal staining, fluorescence and confocal microscopy to detect cell lines expressing Sonic hedgehog. We also assessed the presence of cells that expressed Sonic hedgehog in the developping heart in the past using immunohistochemistry. According to our results, the presence of a descendant cell lineage expressing Sonic hedgehog in the past was demonstrated prenatally and postnatally in the mouse myocardium. The performed analysis shows that these cells can be detected in cardiac tissue from embryonic day 10.5 till the postnatal...

Sonic hedgehog je jeden ze tří členů rodiny Hedgehog, jejíž signální dráha hraje zásadní roli při řízení vývoje obratlovců. Právě Sonic hedgehog má převládající úlohu při organizaci vývojových procesů většiny orgánových systémů. Je zajímavé, že jeho přímá exprese či příspěvek populací exprimujících tuto signální molekulu v myokardu nebyla nikdy popsána. Cílem této práce bylo pokusit se detekovat buňky, které exprimovaly Sonic hedgehog přímo v srdeční tkáni se zaměřením na myokard. Tyto buňky jsme sledovali od embryonálního dne 10,5 do 16,5 a dále postnatálně. Rovněž jsme hodnotili aktuální expresi Sonic hedgehog v srdeční tkáni od embryonálního dne 12,5 do embryonálního dne 15,5. K detekci buněčných linií exprimujících Sonic hedgehog jsme využili CreLoxP systém, X-galové barvení, fluorescenční a konfokální mikroskopii. Přítomnost buněk, které exprimovaly Sonic hedgehog v minulosti jsme ve vyvíjejícím se srdci rovněž hodnotili s pomocí imunohistochemie. Dle našich výsledků byla v myším myokardu prenatálně i postnatálně prokázána přítomnost descendentní linie buněk v minulosti exprimujících Sonic hedgehog. Z provedené analýzy vyplývá, že tyto buňky lze v srdeční tkáni detekovat od embryonálního dne 10,5 až do postnatálního období. Aktuální exprese Shh v srdeční tkáni v embryonálních dnech 12,5 až...