Histochemické změny po účinku vysoce toxických inhibitorů cholinesteráz ve vybraných částech centrální a periferní nervové stoustavy

Abstract

Souhrn NPL patří mezi nejsilnější známé jedy. Vojenské nebo teroristické použití nervově paralytických látek je stále aktuální. Středem zájmu toxikologů je proto v současné době vývoj co nejúčinnějšího antidota jak pro profylaktické použití, tak pro terapii otravy NPL. Hlavní toxický účinek NPL je inhibice enzymu acetylcholinesterázy (AChE), čímž tyto látky ovlivňují cholinergní nervový přenos. Kvantitativní histochemii AChE jsme proto zvolili za metodu, schopnou posoudit efekt silných organofosfátů morfologickým přístupem, s použitím digitální analýzy obrazu. Cílem této práce bylo popsat touto metodou jak obraz otravy NPL v jednotlivých částech nervové soustavy, tak účinek profylaktik a antidot proti NPL. Laboratorní potkany jsme intoxikovali LD50 nebo 1,2x LD50 NPL (Tabun, Soman, Sarin, VX or RVX). V druhé fázi jsme vyšetřovali skupiny s kombinací NPL a profylaktika či antidota, uvedené níže. Kryostatové řezy mozků byly histochemicky vyšetřeny simultánní detekcí AChE dle Karnovskyho a Rootse s detekcí alkalické fosfatázy. Naše výsledky prokazují snížení aktivity AChE ve všech studovaných strukturách CNS při použití středních letálních dávek NPL, více u G-látek než u V-látek. Dále jsme prokázali reaktivační účinek obidoximu při otravě tabunem, méně silný reaktivační účinek látky HI-6, příznivý...

Nerve agents belong to the most important group of highly toxic substances. The threat of their use is still actual in local conflicts or in terrorist attacks. Looking for the optimal measures of medical protection (antidotal therapy and prophylaxis) against them remains in the center of interest of both military and civilian sector. Basic mechanism of action of nerve agents is their interference with cholinergic neurotransmission through the irreversible inhibition of acetylcholinesterase (AChE). We chose quantitative evaluation of AChE histochemistry as a method to assess changes in nerve tissue after untreated or treated intoxication by nerve agents, using computer image analysis. Description of these changes were the aims of this doctoral thesis. The laboratory rats were intoxicated by LD50 or 1,2x LD50 of agent (Tabun, Soman, Sarin, VX or RVX). Prophylactic, respectively antidotal doses of drugs stated below were used as well. The cryostat sections of brains were treated by simultaneous histochemical detection of AChE by Karnovsky and Roots and alkaline phosphatase. The results prove a decrease of enzyme activity in all studied CNS areas treated by mean lethal doses of nerve agents, more in case of G-agents. We establish good effect of obidoxime to reactivate AChE inhibited by tabun, less...