Metabolismus vandetanibu cytochromy P450 exprimovanými v prokaryotním systému

Abstract

Při léčbě nádorových onemocnění, nesoucích konkrétní molekulárně genetické nebo morfologické znaky, se v poslední době začíná uplatňovat biologicky cílená léčba neboli cílená molekulární terapie. Vandetanib je perorálně užívané protinádorové léčivo patřící do skupiny tyrosinkinasových inhibitorů. Tyto inhibitory blokují receptory signálních drah, a tak inhibují růst, zvyšují buněčnou smrt a omezují šíření rakoviny. V dubnu 2011 byl vandetanib schválen americkým úřadem FDA pro léčbu progresivní či symptomatické medulární rakoviny štítné žlázy. Využívá se u lidí s metastázovanou nebo lokálně pokročilou rakovinou, kterou nelze operovat. V předkládané bakalářské práci byl studován metabolismus vandetanibu. Práce rozšiřuje poznatky o kinetice oxidace vandetanibu na N-desmethylvandetanib lidskými rekombinantními cytochromy P450 3A4 exprimovanými v membráně E. coli (Bactosomy). Studován byl vliv přítomnosti cytochromu b5 a vliv hladiny aktivity NADPH:cytochrom P450 reduktasy na aktivitu cytochromů P450 3A4. Za použití Bactosomů byl identifikován demethylovaný metabolit vandetanibu N-desmethylvandetanib, který byl separován vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC). Studium enzymové kinetiky naznačuje, že na oxidaci vandetanibu má vliv jak hladina aktivity NADPH:CYP reduktasy, tak i přítomnost cyt...

1 Abstract Recently, biologically targeted treatment by another name targeted molecular therapies have begun to be used in the treatment of cancers bearing specific molecular genetic or morphological traits. Vandetanib is an oral anticancer drug that belongs to a group of tyrosine kinases inhibitors. These inhibitors block signal pathway receptors, thereby inhibit growth, stimulate cell death and reduce the spread of cancer. Vandetanib was approved in April 2011 by the US FDA for a treatment of progressive or symptomatic medullary thyroid cancer. It is used in patients with metastatic or inoperable locally advanced cancer. The metabolism of vandetanib was studied in this thesis. Specifically, the kinetics of vandetanib oxidation to N-desmethylvandetanib by human recombinant cytochromes P450 3A4 expressed in the membrane of E. coli (Bactosomes). The effect of the presence of cytochrome b5 and the effect of the level of NADPH: cytochrome P450 reductase activity on the activity of cytochrome P450 3A4 were studied. The demethylated metabolite of vandetanib, N-desmethylvandetanib, was identified and separated by high performance liquid chromatography (HPLC). Enzyme kinetics studies indicate that vandetanib oxidation is affected by both, the level of NADPH:CYP reductase activity and the presence of cyt b5....