Chemiluminiscenční stanovení vitamínu B12 technikou sekvenční injekční analýzy

Abstract

Tato bakalářská práce se zabývá nalezením optimálních podmínek pro stanovení vitamínu B12 metodou techniky sekvenční injekční analýzy (SIA). Základem stanovení je chemiluminiscenční reakce, při níž dochází k oxidaci luminolu peroxidem vodíku za katalýzy iontů kobaltu v bazickém prostředí. Pomocí spektrofluorometrického detektoru byla proměřována intenzita chemiluminiscenčního záření a naměřené intenzity byly zaznamenávány. Před samotným stanovením byly experimentálně nalezeny vhodné experimentální podmínky. Celkem byly optimalizovaný 4 parametry, a to hmotnostní procento peroxidu vodíku, poměr objemu mezi dávkovaným vzorkem kobaltnatých iontů a roztokem luminolu, průtoková rychlost vzorku a koncentrace luminolu. Za optimalizovaných podmínek došlo k proměření několika roztoků o známé koncentraci kobaltnatých iontů, na základě čehož byla sestavena kalibrační závislost intenzity chemiluminiscenčního záření na koncentraci iontů kobaltu. Pro toto stanovení byly určeny základní charakteristiky. Pro stanovení samotného vitamínu B12 technikou SIA bylo vycházeno z faktu, že molekula tohoto vitamínu obsahuje právě jeden atom kobaltu, který byl za pomocí působení UV záření z molekuly uvolněn. V závěru práce byla porovnána koncentrace získaná měřením s deklarovanou koncentrací vzorku vitamínu B12 od výrobce....

This bachelor thesis deals to find the optimal conditions for the determination of vitamin B12 by the Sequential Injection Analysis (SIA). The basis of the determination is a chemiluminescence reaction in which luminol is oxidized by hydrogen peroxide under the catalysis of cobalt ions in a basic medium. The intensity of the chemiluminescence radiation was measured using a spectrofluorometric detector and the measured intensities were recorded. Suitable experimental conditions were found experimentally before the actual determination. A total of 4 parameters were optimized, namely, the mass percentage of hydrogen peroxide, the ratio between the dosed cobalt ion sample and the luminol solution, the sample flow rate and the luminol concentration. Under optimized conditions, several solutions of known cobalt ion concentration were measured, from which a calibration dependence of chemiluminescence intensity on cobalt ion concentration could be established. For this determination, the basic characteristics were determined. For the determination of vitamin B12 itself by the SIA technique, it was assumed that the vitamin molecule contains exactly one cobalt atom, which was released from the molecule by the action of UV radiation. At the end of the work, the concentration obtained by the measurement was...