Biologická diverzita buněk karcinomu mléčné žlázy ve vztahu k citlivosti na protinádorovou léčbu

Abstract

Biologická diverzita nádorových buněk karcinomu mléčné žlázy byla studována v in vitro podmínkách metodou expozice cytotoxickému působení zevních agens. Pro testování byly nejprve použity primární buňky karcinomů mléčné žlázy a maligních výpotků, individuálně odebrané pro experimentální stanovení chemorezistence po krátkodobé kultivaci s cytostatiky standardním MTT testem. V několika dostupných případech byla sledována relace ke klinickému průběhu nádorového onemocnění. U 4 ze 7 vzorků byla pozorována dobrá korelace s výsledky terapie. Dále bylo MTT testem na buňkách primárních nádorů a na linii EM-G3 zjišťováno, jaký vliv má kombinace dvou cytostatik v jedné kultivační jamce na viabilitu buněk a jaké jsou možnosti chemosenzitizace tamoxifenem. Pro modelové řešení vývoje diverzifikace populace maligních buněk byla využita nová buněčná linie EM-G3, která byla v naší laboratoři zachycená a ustavená z kultivovaného vzorku primárního mamárního nádoru pro MTT test. Buňky linie EM-G3 reprezentují unikátní, spontánně imortalizovanou klonální buněčnou linii, prokazatelně odvozenou z premaligních progenitorů karcinomu prsu a schopnou částečně diferencovat in vivo. Linie byla detailně charakterizována pomocí řady cytologických i molekulárně biologických technik. Mnohobarevná fluorescenční in situ hybridizace...

Biological diversity of cancer cells isolated from breast carcinoma samples has been studied by in vitro exposure to cytotoxic agents. Primary cells from individual primary breast tumours and malignant effusions were in the first phase of the study used for experimental assessment of chemosensitivity/resistance using the standard MTT assay. Cytotoxic effects after short-term cultivation with antineoplastic drugs were evaluated. In several approachable cases relation to the clinical course of the disease was followed; in 4 out of 7 cases good correlation was found. The effect of combination of two cytotoxic drugs on cell viability was studied on EM-G3 cells, showing interesting results with some drug combinations (e.g. combination of paclitaxel and cisplatin resulted in a lower effect than cisplatin alone). Possibility of cell chemosensitisation by tamoxifen pretreatment was tested. Very low chemosensitisation effects of tamoxifen were observed. As a model cell population for diversification development study a new clonal cell line, EM-G3, was established. The EM-G3 line was derived from a primary lesion of human infiltrating ductal breast carcinoma. The EM-G3 represents a unique, spontaneously immortalized clonal cell line, evidently derived from premalignant progenitors of breast carcinoma. The cells are...