Ionic effects and online preconcentration techniques in separation systems

Abstract

Online preconcentration techniques in capillary electrophoresis (CE) improving sensitivity of electrophoretic separations and are in the scope of interest of many research groups. Therefore, proposal of new techniques for preconcentration and their theoretical description is desirable for their wider application. In this thesis, new preconcentration techniques are proposed and models of ionic strength effects in separation systems of CE and hydrophilic liquid interaction chromatography (HILIC) are presented and new set of pI markers for isoelectric focusing (IEF) was showed with their utilization for characterization of IEF pH gradient. Part of this thesis is keen on proposal of new preconcentration techniques and their theoretical description. We presented two preconcentration techniques, while first is based on sweeping with neutral complexing agent, the second one utilizes pH boundaries that are induced by disturbing phenomena of system zones. Both techniques are described theoretically by means of numerical simulations and by experiments. Both techniques are even utilized for real drug sample or for mixture of similar analytes. For system peak preconcentration technique, flow chart of how to design such method is presented. Second part of this thesis have rather more fundamental subject and...

Online prekoncentrační techniky v kapilární elektroforéze (CE) zvyšují citlivost detekce elektroforetických separací a jsou tak předmětem zájmu mnohých výzkumných skupin. Z tohoto důvodu je návrh nových prekoncentračních technik a jejich teoretický popis žádoucí pro jejich širší využití. Jedním z faktorů ovlivňujících separační podmínky je iontová síla separačních systémů. V rámci této disertační práce byly navrženy nové prekoncentrační techniky a popsány efekty iontové síly v separačních systémech CE a hydrofilní kapalinové interakční chromatografie (HILIC). Současně zde bylo představeno a popsáno 14 nových pI markerů pro isoelektrickou fokusaci (IEF). První část této disertační práce se zabývá návrhem nových prekoncentračních technik a jejich teoretickým popisem. Jsou zde prezentovány dvě prekoncentrační techniky. První z nich je založena na mechanismu sweepingu pomocí neutrálního komplexačního činidla, zatímco druhá využívá pH rozhraní, která jsou vytvořena systémovými zónami. Obě techniky jsou popsány jak teoreticky pomocí numerických simulací, tak experimentálně. Tyto techniky byly také aplikovány pro prekoncentraci účinné látky v komerčně dostupném léčivu a pro směs strukturně podobných analytů. Pro metodu využívající prekoncentraci pomocí systémových zón byl vytvořen diagram umožňující...