Geneticky podmíněná onemocnění rohovky: možnosti včasné detekce, ovlivnění vzniku a progrese.

Abstract

SOUHRN Úvod: Rozvoj molekulárně genetických metod vyvolal v řadě oborů potřebu jejich zařazení do běžné klinické praxe, oftalmologii nevyjímaje. Hlavním cílem této disertační práce byla detailní klinická charakterizace českých pacientů s podezřením na dědičná onemocnění rohovky, využití genetického testování ke stanovení nebo upřesnění jejich diagnózy a následně pak i v klinickém a genetickém poradenství, v konečném důsledku vedoucí k preventivním opatřením bránícím ztrátě zrakové ostrosti. Materiál a metody: Jedinci zařazeni do výzkumu byli buď dlouhodobě sledováni, nebo nově odesláni oftalmology ke konziliárnímu vyšetření na Rohovkovou ambulanci Oční kliniky 1. LF UK a VFN v Praze. Detailní klinické vyšetření zahrnovalo rohovkovou tomografii, zrcadlovou mikroskopii, optickou koherenční tomografii se spektrální doménou, biometrii a genealogickou analýzu. DNA byla izolována z leukocytů venózní krve, popř. buněk bukální sliznice. Příčinné varianty byly hledány pomocí Sangerova a masivně paralelního sekvenování a jejich patogenita prokazována pomocí různých algoritmů, sledováním segregace u rodinných příslušníků. V některých případech bylo přistoupeno i k funkčním studiím, např. analýze sestřihu. U pacientů s Fuchsovou endotelovou dystrofií rohovky (FECD) bylo provedeno genotypování trinukleotidové repetice v...

Introduction: The development of molecular genetic methods has in many fields necessitated their inclusion in routine clinical practice, including ophthalmology. The main aim of this thesis was detailed clinical characterization of Czech patients with suspected inherited corneal disorders, followed by genetic testing to determine or specify their clinical diagnosis and subsequently to use the knowledge gained in clinical and genetic counselling and to apply preventive measures in order to avoid loss of vision. Material and Methods: Individuals included in this research were either followed up or newly referred to the Cornea clinic of the Department of Ophthalmology, First Faculty of Medicine, Charles University and General University Hospital in Prague. Detailed clinical examination included corneal tomography, specular microscopy, spectral domain optical coherence tomography, biometry and genealogical analysis. DNA was extracted from peripheral blood leucocytes or buccal cells. Disease-causing variants were searched for using Sanger or massively parallel sequencing, variant pathogenicity was assessed in silico using various algorithms and by segregation analyses within the families. In some cases assessment of the functional impact on the pre-mRNA splicing process was performed. In patients with...