Vliv kryokonzervace na kmenové buňky

Abstract

Vliv kryokonzervace na kmenové buňky Souhrn Úvod: Tématem této práce je kryokonzervace kmenových buněk zubní dřeně (KBZD). Kryokonzervace je metoda uchovávání buněk a tkání při teplotách hluboko pod bodem mrazu, při níž jsou biologické pochody zastaveny. Odstraňuje nutnost udržovat kmenové buňky (KB) v dlouhodobé kultivaci, umožňuje skladování KB pro potenciální budoucí klinické využití, případně pro klinické testování. Pro plné využití kryokonzervace v preklinické a klinické praxi je nezbytné objasnění nežádoucích efektů na kryokonzervované buňky. Cílem tohoto výzkumu bylo ověření vlivu metody neřízené kryokonzervace na KBZD s použitím dimethylsulfoxidu (DMSO) v koncentraci 10 % jako kryoprotektiva (KPA). Metodika: Vliv neřízené kryokonzervace jsme zjišťovali porovnáním velikosti, viability, proliferační aktivity, fenotypu, relativní délky telomer a diferenciačního potenciálu nezmrazených a zamrazených KBZD po dobu šesti a dvanácti měsíců. KBZD byly izolovány ze stálých zubů od dárců ve věku 13 - 18 let. Výsledky a závěr: Dle výsledků této práce mohou být KBZD efektivně kryokonzervovány technicky nenáročnou metodou neřízené kryokonzervace minimálně po dobu 12 měsíců. Nepozorovali jsme vliv kryokonzervace na jejich morfologii, fenotyp a diferenciační potenciál. U kryokonzervovaných KBZD došlo k jejich...

Effect of cryopreservation on stem cells Summary Background: The topic of this study is the cryopreservation of dental pulp stem cells (DPSCs). Cryopreservation is a process of sustaining the viability of cells and tissues by freezing and storing them at sub-zero temperatures where biochemical reactions do not occur. It eliminates the need to preserve stem cells through long-term cultures, allows the storage of stem cells for potential future clinical use or clinical studies. However, it is necessary to fully understand any adverse effects on cryopreserved cells for full applicability in preclinical and clinical practice. The purpose of this study was to determine the effect of cryopreservation on DPSCs stored for 6 and 12 months using an uncontrolled-rate freezing technique. Methods: We successfully isolated ten dental pulp stem cell lineages from donors aged 13 - 18 years to be able to observe the effect of an uncontrolled rate freezing technique on cell size, viability, proliferation activity, relative telomere length, and differentiation potential. We used 10 % dimethyl sulfoxide (DMSO) as a cryoprotective agent (CPA). Results and conclusion: According to the data obtained, the uncontrolled-rate freezing technique is not technically demanding, and it is sufficient for the successful cryopreservation of...