Chirální separace biologicky aktivních látek v chromatografii

Abstract

- 3 - Abstrakt v češtině Tato diplomová práce je zaměřena na zhodnocení a porovnání enantioselektivního potenciálu dvou kolon, CHIRAL ART Amylose-SA a CDShell-RSP, na sadě 29 chirálních léčiv metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Separace enantiomerů probíhala ve třech módech: reverzním, normálním a polárně-organickém. Kolona CHIRAL ART Amylose-SA byla testována v normálním módu, kolona CDShell- RSP v reverzním a polárně-organickém. Kolona CHIRAL ART Amylose-SA obsahuje jako chirální stacionární fázi amylózu tris(3,5-dimethylfenylkarbamát), která je imobilizovaná na porézních silikagelových částicích o velkostí 3 µm. Kolona CDShell-RSP obsahuje jako chirální stacionární fázi hydroxypropyl-β-cyklodextrin, který je kovalentně navázán na pelikulárních částicích o velikosti 2,7 µm. V normálním módu byly použity mobilní fáze složené z hexanu a propan-2-olu. Dále byl testován vliv aditiv (triethylamin, diethylamin, kyselina trifluoroctová, směs diethylaminu a kyseliny trifluoroctové) v mobilní fázi na enantioseparaci analytů. Nejuniverzálnějším aditivem byla směs diethylaminu a kyseliny trifluoroctové. Celkově se na koloně CHIRAL ART Amylose-SA enantioseparovalo 22 analytů, z toho 10 na základní linii. Mobilní fáze pro reverzní mód byly složené z 10 mM octanu amonného (pH 3,0; 4,0; 6,5) a methanolu nebo...

- 4 - Abstract in English This diploma thesis is focused on the evaluation and comparison of the enantioselective potential of two columns CHIRAL ART Amylose-SA and CDShell-RSP using a set of 29 chiral drugs in high performance liquid chromatography. The separations of enantiomers were performed in three modes: reversed-phase, normal-phase, and polar- organic mode. The CHIRAL ART Amylose-SA column was tested in normal-phase mode, the CDShell-RSP column in reversed-phase and polar-organic modes. The CHIRAL ART Amylose-SA column contains amylose tris(3,5- dimethylphenylcarbamate) immobilized on 3 µm porous silica gel particles. The CDShell-RSP column contains a chiral selector hydroxypropyl-β-cyclodextrin, which is covalently bonded on 2.7 µm superficially porous particles. In the normal-phase mode, mobile phases composed of hexane and propane-2-ol were used. Furthermore, the effect of various additives (triethylamine, diethylamine, trifluoroacetic acid, and the mixture of diethylamine and trifluoroacetic acid) in the mobile phase on the enantioseparation of chiral drugs was tested. The most universal additive was a mixture of diethylamine and trifluoroacetic acid. A total of 22 chiral drugs were enantioseparated on the CHIRAL ART Amylose-SA column, 10 of them were baseline separated. Mobile phases for...