Využití komprehensivní dvoudimenzionální plynové chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí pro metabolomickou analýzu houby Gloeophyllum trabeum

Abstract

Houba Gloeophyllum trabeum (Agaricomytes: Gloeophyllates), v českém jazyce známá jako Trámovka trámová, je dřevokazná houba, která produkuje široké spektrum těkavých sekundárních metabolitů. V literatuře bylo popsáno, že jedním z produkovaných sekundárních metabolitů je (3Z,6Z,8E)-dodekatrien-1-ol. Tato chemická látka je zároveň hlavní složkou stopovacího feromonu termitů čeledi Rhinotermitidae. V této diplomové práci jsem ověřoval, zda různé kmeny G. trabeum produkují látku (3Z,6Z,8E)-dodekatrien-1-ol. Dále byl studován vliv sacharidů přítomných v živných roztocích na změnu v kvalitativní a kvantitativní složení těkavých sekundárních metabolitů produkovaných touto houbou. Zvolené sacharidy byly maltóza, fruktóza, sacharóza, xylóza a manóza. Analýza byla prováděna pokročilou separační technikou komprehensivní dvoudimenzionální plynové chromatografie s průletovým analyzátorem a hmotnostně spektrometrickou detekcí (GC×GC-TOFMS). Zjistil jsem, že jeden ze získaných kmenů G. trabeum skutečně produkuje látku (3Z,6Z,8E)-dodekatrien-1-ol, ale pouze za specifických podmínek, tj. při kultivaci na Petriho miskách na agar - celulózovém médiu. Toto měření bylo dále potvrzeno derivatizační reakcí dodekatrienolu se silylačním činidlem N, O-bis(trimethylsilyl) acetamidem (BSA). Pro vzorky G. trabeum kultivované v...

Fungus Gloeophyllum trabeum (Agaricomytes: Gloeophyllates) is a brown rot wood-decay fungus which produces a vast spectrum of volatile secondary metabolites. Scientific publications state, that one of the metabolites produced by G. trabeum, can be the substance (3Z,6Z,8E)-dodecatrien-1-ol. This chemical substance is also the main component of trail-following pheromone of Rhinotermitidae termite family. In this diploma thesis, I was trying to verify whether various species of G. trabeum are in fact capable of producing the substance (3Z,6Z,8E)-dodecatrien-1-ol. I was also focusing on the effects of saccharides, present in nutrient solutions, on quantitative and qualitative change in composition of volatile secondary metabolites produced by G. trabeum. The saccharides I used for my research were - maltose, fructose, sucrose, xylose, and mannose. The analysis was made by using comprehensive two-dimensional gas chromatography separation technique with time-of-flight mass spectrometric detection (GC×GC-TOFMS). During my research I discovered that one of obtained species of G. trabeum can produce substance (3Z,6Z,8E)-dodecatrien-1-ol, but only under specific conditions. It is produced when cultivating on Petri dishes on agar - cellulose growth media. The measurement was further validated by...