Charakterizace lipidů se čtyřmi esterovými vazbami v novorozeneckém mázku pomocí HPLC/MS

Abstract

Diplomová práce se věnuje analýze triacylglycerolových estolidů (TG-est) pomocí HPLC/MS. Tyto lipidy obsahují čtyři esterové vazby. Vyskytují se v některých rostlinných olejích a u savců slouží jako zásobní forma metabolicky významných estolidů mastných kyselin. Cílem této práce bylo prokázat existenci TG-est v novorozeneckém mázku a prozkoumat možnosti jejich analýzy v tomto materiálu. S využitím vysokorozlišující a tandemové hmotnostní spektrometrie byla prostudována spektra standardů TG-est. Byla navržena a optimalizovaná metoda pro HPLC TG-est v reverzním nevodném systému s využitím kolony Kinetex C18 a gradientové eluce acetonitrilem a 2-propanolem. Tato metoda byla použita pro analýzu frakce lipidů novorozeneckého mázku, přičemž bylo prokázáno, že TG-est se ve zkoumaném vzorku skutečně vyskytují. Pokusy zjednodušit lipidový vzorek před HPLC/MS analýzou pomocí frakcionace na TLC nebyly příliš úspěšné.

Diploma thesis is devoted to the analysis of triacylglycerol estolides (TG-est) by HPLC/MS. These lipids contain four ester bonds. TG-est are part of some vegetable oils and in mammals function as a storage form of metabolically important fatty acid estolides. The aim of this thesis was to prove the existence of TG-est in vernix caseosa and explore the possibilities of analysis in this material. Standards of TG-est were studied with using high-resolution and tandem mass spectrometry. Was suggested and optimized HPLC method for TG-est in a reverse nonaqueous system with the use of column Kinetex C18 and gradient elution with acetonitrile and 2-propanol. This method was used for analysis vernix caseosa fraction, and it was shown that TG-est are present in the sample. Attempts to simplify the lipid sample before analysis HPLC/MS by TLC fractionation were not very successful.