The study of Xenopus tropicalis testis-derived stem cells

Abstract

Studium kmenových buněk odvozených z varlat Xenopus tropicalis Nguyen Thi Minh Xuan Abstrakt Sertoliho buňky (SCs) produkují celou řadu molekul klíčových pro determinaci samčího pohlaví a pro regulaci spermatogeneze v dospělosti. Poruchy diferenciace Sertoliho buněk vedou u člověka ke sterilitě. Před nástupem puberty hrají důležitou roli v udržení spermatogoniálních buněk v kmenovém stavu a zajišťují tak jejich dostatečný počet. Zajímavým znakem odlišujícím nezralé a zralé Sertoliho buňky je dočasná přítomnost cytokeratinu, který byl u těchto buněk popsán u celé řady modelových organismů. V rámci této disertační práce jsme se zabývali rozdílnou genovou expresí proteinů spojených s regulací cytokeratinu u nezralých a zralých Sertoliho buněk odvozených z varlat Drápatky tropické (Xenopus tropicalis). Imunohistochemické řezy varlat z juvenilních jedinců a imunocytochemická analýza buněčné kultury odvozené ze stejného zdroje, obsahující nezralé progenitory Sertoliho a peritubulárních myoidních buněk (XtiSC) ukázaly na společnou expresi cytokeratinu a membránového β-kateninu. V případě vzorku z dospělých jedinců nebyla detekována přítomnost ani jednoho z nich. Dále pak podobný fenotyp vykazovaly i migrující Sertoliho buňky (pre- SCs), které se nacházely mimo semenotvorné kanálky. I zde byla exprese obou proteinů...

The study of Xenopus tropicalis testis-derived stem cells Nguyen Thi Minh Xuan Abstract The substances secreted by Sertoli cells (SCs) are crucial to determine male sex characteristics in embryos and regulate spermatogenesis in adulthood. The failure in SC maturation can cause sterility in men. Before puberty, SCs keep the ability to proliferate and have been considered as immature cells. They differ remarkably from mature cells in connection with their morphology and biochemical activity and thus they probably play a part in maintaining spermatogonia stem cells in an undifferentiated stage. The transient presence of cytokeratin in immature SCs has been reported in many species, but not in Xenopus yet. We investigated which molecules are expressing only in immature Sertoli cells of X. tropicalis testes. The regulation of cytokeratin and β-catenin was revealed by fluorescent immunostaining. Cytokeratin and membrane β-catenin co- expressed in X.tropicalis juvenile testes and in cultured SC progenitors, called XtiSCs, but they were absent in adulthood. There was no signal of cytokeratin in migrating SCs (pre-SCs) located outside the seminiferous tubules. The suppression of cytokeratin along with the breakdown of β-catenin-based cell contacts have been observed in XtiSCs after the treatment with a small...