Vývoj terapeutické vakcíny proti nádorům vyvolaným lidským papilomavirem 16 - vliv modifikace antigenu E7 na buněčnou imunitní odpověd

Abstract

Zúýěry Zkonstruovďijsme vakcínynesoucíantigenE7 viru I{PV-16 nabází toxoidu CyaAB.peranis. Z,avedhjsme mďody ELISPOT a aňeni MHC-I teEam€rem pro testování buněčnéimunitníodpovědiu myšíhomodelu Testovalijsme buněčnouimunitníodpověďpo imunizacirůmýmitypy vakcín nesoucímimodifikovanýantigenE7 viru HPV.I6: o Rekombinantníadenyltt cytJázrý toxoid CyaA336|E1 je schopen vyvolat u myšíE7 specifickou CD8* buněčnouimunitníďpověď a chránitje před růstemTC-l nádorů o Některé DNA vakcíny nesoucí gen w fúzovanýsdalším genem ine*ují u myšíprotinádorovoubuněčnouimunimíodpovčďlépenež samofuý gen E7 @NA vakcíny seřazenypodle velikosti indukované CTL odpovědi:E7GGG.GUS >E7GGGHSP, E7HSP>> CP-w>W) o FúzeE7 s hemaglutininemW vede k povrchovéexpresiE7, cožpo vakcinaci rekombinantnímvirem vakcfoiieW-E7.HA vede k indukci Th-2 polarizovanéhottpu imunihí odpovědia potlačeníprotinádorové odpovědib'pu Th-l o Koexprese n--|2 z dvojitě rekombinantniho viru vakcínie (W-tr-- 12-sig/E7 ILA\E) snižujeCD8* buněěnouimunifuíodpověď indukovanouSig/E7lLAMP o Imunizace dendritickjmi buňkami transdukovanými rYÝ zrryšuje účinnostvakcinacerW o Kombinovaná imunizacezvyšujeúčinnostvakcinace (CyaA336/E7+MVA-Sig/EZLAMP, DNA-Sig/E7GGG/LAMP+bWěěná vakcína)

Conclusions We constructed the vaccines carrying IIPV-16 E7 antigen based on .B. pertussisCyaA toxin We introduced ELISPOT and MHC-I totaÍner assays for testing of cell-mediarcdimmrmeresponsein themousemodel We tested cell-mediated immune response following immunization with differentkinds of thevaccinescarryingthemodifiedHPV-16 E7 antigen: o Recombinantadenylďe cyclase toxoid CyaA336IE7 is able to induce E7 specific CDE- cellular immuneresponsein mice and proteď them againstTC-l firmorgrowth o Some DNA vaccines carying the E7 genefusď to anothergeneare able to induoe betteranti-tumorimmuneresponsethan non-modified E7 genein mice @NA vaccinesevďuated accordingto themagpitude of CTL responseinduced: ETCTGG.GUS > ETGGGHSP, ETHSP >> cP-E7 >E7) o Fusion of E7 with W hemagglutininleadsto cell-surfaceexpressionof E7 and following vaccinďion with W.E7.HA it induces Th-2 polarized immuner€spons€ type ďong with the absenceof anti.tumor Th-l response o Co-expression of IL-12 from double recombinant vaccinia virus (W.IL-l2-sig/E7|LAI\D) reducesCD8- cellular immuniý inducedby Sig/E7lLAMP o Immunization with dendritic cells transducedby rW improves the efficacy of rW vaccination o Combined immunization increases vaccination effectiveness (CyaA336/E7+MVA- Sig/E7lLAMP, DNA-SigETGGG/LAMP+cellular vaccine) I7