Vývoj a optimalizace nové chromatografické metody pro stanovení retinolu v moči
Development and optimization of new chromatographic method for determination of retinol in human urine
diplomová práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/98417Identifikátory
SIS: 181523
Kolekce
- Kvalifikační práce [6393]
Autor
Vedoucí práce
Oponent práce
Sklenářová, Hana
Fakulta / součást
Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Obor
Farmacie
Katedra / ústav / klinika
Katedra analytické chemie
Datum obhajoby
4. 6. 2018
Nakladatel
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci KrálovéJazyk
Čeština
Známka
Velmi dobře
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Zuzana Mikanová Školitel: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a optimalizace nové chromatografické metody pro stanovení retinolu v moči Tato diplomová práce se zabývá vývojem metody pro stanovení retinolu a kreatininu v moči pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Cílem bylo vytvořit optimální chromatografické podmínky pro klinický výzkum. Experimenty byly prováděny na přístroji UHPLC Nexera, (Shimadzu, Japonsko) s hmotnostním spektrometrem LCMS-8030 (Shimadzu, Japonsko). Byly testovány 3 stacionární fáze. K separaci byla použita kolona Kinetex 2,6 µm PFP 100A 100x4,6 mm (Phenomenex, USA). Mobilní fáze byla připravena z acetonitrilu (s přídavkem kyseliny mravenčí 0,005 M) a octanu amonného (pH 6,69) v poměru 78:22. Teplota byla nastavena na 25řC, průtok na 0,5 ml/min a nástřik zvolen 3 µl. Po optimalizaci separačních podmínek byla metoda aplikována na moč, pro kterou byly testovány některé jednoduché úpravy vzorku. Metoda byla částečně validována. Na metodě se dále pracuje a v budoucnu by měla být přínosná v oblasti stanovení renálního poškození v klinickém výzkumu i praxi. Zařazení kreatininu pro korekci a zároveň společné stanovení je velice výhodné....
Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Zuzana Mikanová Supervisor: assoc. prof. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Title of the Diploma Thesis: Development and optimization of new chromatographic method for determination of retinol in human urine This diploma thesis is based on the method development for determination of retinol and creatinine using HPLC. The aim of this project was to find optimal HPLC-MS/MS conditions for clinical research. Experiment was carried out using UHPLC set Nexera with mass spectrometer LCMS- 8030, (Shimadzu, Japan). Three stationary phases were tested. The chromatographic separation was achieved using a Kinetex 2.6 µm PFP 100A 100x4.6 mm (Phenomenex, USA). The used mobile phase consisted of acetonitrile (with addition of formic acid 0.005 M) and ammonium acetate (pH 6.69 ) in the ratio 78:22 (v/v). The temperature was maintained at 25řC, flow rate was set at 0.5 ml/min and 3 µl of sample was injected. After optimization of separation conditions, the method was applied to urine samples, and simple sample preparation procedures were tested In these days is the work on method finishing and the new method will be used for determination of renal damage in clinical research and practice. The inclusion of...