Stanovení mykotoxinu citrininu pomocí on-line SPE HPLC na molekulárně vtištěných polymerech

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Aneta Kholová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení mykotoxinu citrininu pomocí on-line SPE HPLC na molekulárně vtištěných polymerech Cílem této práce bylo vytvořit rychlou metodu pro stanovení mykotoxinu citrininu (CIT) za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) a techniky přepínání kolon v kombinaci s on-line extrakcí na pevné fázi (SPE) na molekulárně vtištěných polymerech (MIP). Nejvhodnější sorbent pro selektivní extrakci byl vybrán ze šesti nově nasyntetizovaných MIP po vyhodnocení jejich vazebné kapacity a selektivity. Selektivita byla testována porovnáním molekulárně vtištěných a nevtištěných polymerů a schopností polymeru selektivně oddělit citrinin od interferencí z testovaného vzorku. Nejlepším sorbentem MIP (funkční monomer metakrylamidu s porogenem acetonitrilem) byla naplněna předkolona (20 × 3 mm) a zapojena do systému přepínání kolon HPLC. Na tento chromatografický systém byly dávkovány tři různé typy matric (extrakt z potravních doplňků, červené fermentované rýže a obilovin). Dávkovaný objem vzorku 50 μl byl na MIP extrakční předkoloně promýván od interferencí methanolem / 0,5% vodným roztokem kyseliny octové v poměru 25:75 (v/v),...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Aneta Kholová Supervisor: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Determination of mycotoxin citrinin using on-line SPE HPLC on molecularly imprinted polymers The aim of this work was to develop a fast method for mycotoxin citrinin (CIT) determination using high performance liquid chromatography (HPLC) and column switching technique in combination with on-line solid phase extraction (SPE) based on citrinin-selective molecularly imprinted polymer (MIP). The most suitable sorbent for selective extraction was chosen from six newly synthetized MIP after evaluation of their binding capacity and selectivity. Selectivity was tested by comparing molecularly imprinted and non-imprinted polymers and the ability of the MIP polymer to selectively separate citrinin from interferences of the test sample. The best MIP (functional monomer of metacrylamide with porogen acetonitrile) was filled into pre-column (20 × 3 mm) and connected to HPLC column-switching system. Three different matrices were injected to chromatographic system. 50 μl of the sample was injected onto MIP extraction column and washed out of interferences with methanol / 0.5% water solution of acetic acid in a ratio of...