Achirální a chirální vysokoúčinná kapalinová chromatografie léčiv a jejich metabolitů III.

Abstract

Nabumeton je nesteroidní protizánětlivé proléčivo, které je v játrech přeměněno na účinnou látku kyselinu (6-methoxynaftalen-2-yl)octovou. Rozdíl biotransformace nabumetonu in vitro na potkaních a lidských cytosolárních a mikrosomálních frakcích byl studováno již dříve. Studium stereospecificity enzymů a výpočet enantiomerních poměrů vzniklých chirálních metabolitů, je stejně důležitou charakteristikou enzymu jako je Michaelisova konstanta. Výpočet enantiomerních poměrů metabolitů vzniklých z prochirálních léčiv v in vitro systémech se následně používá k identifikaci nových enzymů zodpovědných za biotransformaci daného prochirálního léčiva. Tato práce se zabývá optimalizací separačních a detekčních podmínek pro achirální a chirální LLE-HPLC-PDA analýzu nabumetonu a jeho šesti metabolitů v extraktech z různých biomatric (lidské jaterní mikrosomální a cytosolární frakce a miniprasečí krevní plasmy). S využitím chirální LLE-HPLC-PDA analýzy byly studovány rozdíly v biotransformaci nabumetonu a racemické směsi 3-HO-nabumetonu mezi mužem a ženou v in vitro podmínkách v extraktech pocházejících z jaterních cytosolárních a mikrosomálních frakcí. Pomocí achirální LLE-HPLC-PDA analýzy byla studována farmakokinetika 6-MNA v krevní plasmě miniprasete po enterálním podání 1 g nabumetonu do miniprasečího...

Nabumetone is non-steroidal anti-inflammatory prodrug that is converted into (6-methoxynaphthalen-2-yl)acetic acid in the liver. The differences of in vitro nabumetone biotransformation (rat vs human liver cytosolic and microsomal fractions) were studied in previous communication. Study of stereospecificity of enzymes and the calculation of enantiomeric ratios of the biotransformed chiral metabolites is an equally important characteristic of enzymes such as the Michaelis constant. Calculation of enantiomeric ratios of chiral metabolites biotransformed from prochiral drugs in vitro is used to identify new enzymes responsible for the biotransformation of a given prochiral drug. This work deals with the optimization of separation and detection conditions for achiral and chiral LLE-HPLC-PDA analysis of nabumetone and its six metabolites in extracts from various biomatrixes (human liver microsomal and cytosolic fractions and minipig blood plasma). Differences in biotransformation of nabumetone and racemic mixture of 3-HO-nabumetone between man and woman were studied in vitro in extracts from liver cytosolic and microsomal fractions, using chiral LLE-HPLC-PDA analysis. Enantiomeric ratios of all chiral metabolites of nabumetone were calculated. Pharmacokinetics of 6-MNA in minipig blood plasma after...