Vývoj on-line SPE-HPLC metody pro stanovení zearalenonu ve vzorcích piva

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Barbora Gajdošová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj on-line SPE-HPLC metody pro stanovení zearalenonu ve vzorcích piva K vývoji metody pro stanovení mykotoxinu zearalenonu v pivu bylo využito vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s on-line extrakcí na tuhou fázi (SPE) pomocí techniky přepínání kolon pro úpravu vzorku. Byly testovány dva rozdílné sorbenty pro SPE. Vzorek piva o objemu 50 µl byl dávkován přímo do systému. Po nástřiku vzorku došlo k extrakci zearalenonu z matrice na extrakční předkoloně Ascentis® Express C18 Guard Cartridge (5 x 4,6 mm, 5 µm), která je na bázi reverzní fáze nebo na kolonce (10 x 4,6 mm) naplněné sorbentem Affinimip® SPE Zearalenone, což je specifický molekulárně vtištěný polymer, určený pro selektivní extrakci zearalenonu. Jako promývací fáze pro odstranění balastní matrice byl vybrán pro extrakční předkolonu C18 40% roztok methanolu s 2% vodným roztokem kyseliny octové a pro Affinimip 10% roztok acetonitrilu s 2% vodným roztokem kyseliny octové, tyto promývací roztoky protékaly extrakční kolonkou rychlostí 2 ml/min po dobu 2 minut. Po přepnutí ventilu byly látky dále separovány na chromatografické koloně Kinetex...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Barbora Gajdošová Supervisor: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: On-line SPE-HPLC method development for determination of zearalenone in beers High performance liquid chromatography coupled with on-line solid phase extraction (SPE) using the column switching technique for sample preparation was utilized for the development of the method for the determination of mycotoxin zearalenone in beer. Two different SPE sorbents were tested. A volume of 50 µl of beer sample was injected directly into the chromatographic system. After injection, the sample extraction of zearalenone from the matrix was carried out on SPE precolumn Ascentis® Express C18 Guard Cartridge (5 x 4.6 mm, 5 µm), which is based on the reverse phase, or on SPE precolumn (10 x 4.6 mm) filled with Affinimip® SPE Zearalenone sorbent, a specific Moleculary Imprinted Polymer, designed for the selective extraction of zearalenone. 40% methanol - 2% water solution of acetic acid was selected as the washing solution for removing ballast matrix for the C18 extraction column and 10% acetonitrile - 2% water solution of acetic acid for the Affinimip column. These washing solutions were flowed through the...