Analytické hodnocení účinných látek kapalinovou chromatografií VI.

Abstract

ANALYTICKÉ HODNOCENÍ ÚČINNÝCH LÁTEK KAPALINOVOU CHROMATOGRAFIÍ VI. Diplomová práce Kristýna Kuželová Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové Byla optimalizována metoda stanovení piroxikamu v králičí plasmě pomocí mikroextrakce na tuhé fázi (SPME) s využitím vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s UV detekcí. Pro mikroextrakci bylo použito vlákno potažené PDMS/DVB. Jako vnitřní standard byl vybrán isoxikam. Vzorek plasmy byl upraven na hodnotu pH 2,5. Mikroextrakce se skládala z 20 minut sorpce a 20 minut desorpce do 200 μl methanolu. Separace byla provedena na koloně s reverzní fází C18. Jako mobilní fáze byl použit roztok čištěné vody a acetonitrilu (60:40 v/v), upravený kyselinou mravenčí na hodnotu pH 2,5. Průtok kolonou byl 1 ml/min a teplota na koloně 40řC. Hodnocení probíhalo při 333 nm. Byla ověřena linearita a selektivita metody. Také byl stanoven limit detekce a kvantifikace pro piroxikam.

ANALYTICAL EVALUATION OF ACTIVE SUBSTANCES BY LIQUID CHROMATOGAPHY VI. Diploma Thesis Kristýna Kuželová Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Kralove, Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control, Heyrovského 1203, Hradec Králové The method for determination of the piroxicam in rabbit plasma using solid phase microextraction (SPME) and high performance liquid chromatography (HPLC) with UV detection was optimalized. Fiber coated with PDMS/DVB was used for microextraction. Isoxicam was chosen as an internal standard. The sample of plasma was adjusted to pH 2,5. Microextraction was composed of 20 minutes sorption and 20 minutes desorption into 200 μl of methanol. Column with reversed phase C18 was used for separation. A solution of water and acetonitrile (60:40 v/v) was used as the mobile phase. Its pH was adjusted to 2,5 using formic acid. The flow rate was 1 ml/min and temperature on the column was set at 40řC. The detection was carried out at 333 nm. Linearity and selectivity of the method were verified. Detection and quantification limits for piroxicam were also determined.