On-line spojení techniky MEPS a HPLC pro analýzu léčiv moči

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Vojtěch Sobek Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: On-line spojení techniky MEPS a HPLC pro analýzu léčiv v moči Byla vyvinuta a validována metoda on-line spojení techniky MEPS a HPLC pro analýzu metoprololu, labetalolu a propranololu v moči. K analýze byla použita kolona YMC Triart 50 mm x 4,6 mm - velikost částic 5 µm. Detekce probíhala pomocí fluorescenčního detektoru při hodnotách excitační vlnové délky 220 nm a emisní vlnové délky 315 nm. Teplota kolony byla 30 řC a pro separaci byla využita gradientová eluce s mobilní fází 0,5% vodný roztok triethylaminu upravený na pH 4,5 pomocí ledové kyseliny octové s acetonitrilem v poměru 80/20 s průtokovou rychlostí 1,0 ml/min. Před samotnou analýzou byly β - blokátory z matrice moči zakoncentrovány s využitím mikroextrakce (MEPS) na extrakční koloně C - 18 SGE Analytical Science s použitím 7% acetonitrilu jako promývací mobilní fáze a průtokovou rychlostí 0,5 ml/min. Byla vytvořena originální metoda, která umožňuje stanovení vybraných tří β - blokátorů v matrici moči bez předchozí úpravy vzorku. Klíčová slova: HPLC, MEPS, metoprolol, labetalol, propranolol, moč

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Vojtěch Sobek Supervisor: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: On-line coupling of MEPS with HPLC for determination of pharmaceuticals in urine A new method for on-line coupling of MEPS with HPLC was developed and validated for analysis of metoprolol, propranolol and labetalol in the urine. The column Triart YMC 50 mm x 4.6 mm - 5 µm particle size was used for separation of three β - blockers - metoprolol, labetalol and propranolol. Detection was carried out using a fluorescence detector at excitation wavelength 220 nm and emission wavelength 315 nm and the column temperature was set on 30 řC. Gradient elution with a mobile phase of 0,5% aqueous solution of triethylamine adjusted to pH 4.5 with glacial acetic acid with acetonitrile in ratio 80/20 at a flow rate of 1.0 ml/min was used for separation. Before the analysis, the β - blockers were extracted and preconcentrated from urine matrix with using microextraction to on MEPS column C - 18 SGE Analytical Science using 7% acetonitrile as a washing solution and the washing flow rate of 0.5 ml/min. Original method allows the determination of the three selected β - blockers in the urine matrix without previous sample...