Biological activity of antioxidant compounds in monocytes THP-1

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Univezita Roma Tre Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologie Katedra biochemických věd Kandidát: Jan Hájek Školitel: PharmDr. Iva Boušová, PhD. Prof. Sandra Incerpi, Prof. Jens Z. Pedersen Název diplomové práce: Biologická aktivita antioxidačních látek v monocytech THP-1 Tato práce byla vytvořena na základě pokusů provedených v Laboratoři fyziologie na Univerzitě Roma Tre v Římě pod vedením prof. Sandry Incerpi. Tým laboratoře se zabývá studiem antioxidantů s různou strukturou a hodnocením jejich schopnosti zabránit tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto reaktivní sloučeniny jsou nezbytné v mnoha fyziologických pochodech, ale mohou mít také škodlivé účinky a podílet se na rozvoji rozličných onemocnění. V této práci jsem se zabýval studiem antioxidačních vlastností různých polyfenolických látek (mosloflavon, negletein, 5,6-dihydroxyflavon, bajkalein, kyselina galová a sloučenina 1625) v buněčné kultuře lidských monocytů THP-1 a také v in vitro testu. Použil jsem tři různé metody: stanovení intracelulárních ROS (dichlorofluoresceinový test), test cytotoxicity a elektronovou paramagnetickou rezonanční spektroskopii (EPR). Mosloflavon neukázal žádnou vychytávací aktivitu ani v buněčné linii ani během EPR. Naproti tomu negletein měl dobrou vychytávací...

Charles University in Prague University Roma Tre Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biology Department of Biochemical Sciences Candidate: Jan Hájek Supervisor: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Prof. Sandra Incerpi, Prof. Jens Z. Pedersen Title of diploma thesis: Biological activity of antioxidant compounds in monocytes THP-1 Elaboration of this work is based on the experiments carried out in the Laboratory of Physiology at University Roma Tre in Rome, under the supervision of Prof. Sandra Incerpi. The team of this laboratory studies the antioxidants of different structures and evaluates their ability to prevent the production of reactive oxygen species (ROS). These reactive species are essential for many physiological processes, but they can also have deleterious effects and participate in the development of various diseases. In this work, I dealt with a study of antioxidant properties of different polyphenolic compounds (mosloflavone, negletein, 5,6-dihydroxyflavone, baicalein, gallic acid, and compound 1625) in the cell culture of human monocytes THP-1 and also in the in vitro test. Three different methods were used: intracellular ROS determination (dichlorofluorescein assay), cytotoxicity assay, and electron paramagnetic resonance spectroscopy (EPR). Mosloflavone showed scavenging...