Hodnocení stability nových aroylhydrazonových chelátorů železa v biologickém materiálu II.

Abstract

58 7. Abstrakt Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) se řadí mezi nejužívanější separační metody při kvantitativním a kvalitativním hodnocení léčiv. Tato práce se zabývá optimalizací chromatografické metody a její aplikaci při hodnocení stability dvou nových chelátorů železa 2,6 DHAF-INH a AHC-INH v králičí plazmě. Tyto deriváty byly nasyntetizovány z důvodu zvýšení stability jejich hydrazonové vazby oproti jejich mateřské látce salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazonu (SIH). Nejlepšího rozlišení u obou hodnocených derivátů, jejich rozkladných produktů a vnitřního standartu (SIH) bylo dosaženo použitím chromatografické kolony s reverzní stacionární fází LiChroCART HPLC - cartrige LiChrospher 100 RP - 18e (5µm) s předkolonou. Mobilní fází při analyzování 2,6DHAF-INH byla vybrána směs fosfátového pufru (0,01 M vodný roztok NaH2PO4 . 2 H2O s 2 mM EDTA; pH 6.0) a methanolu v poměru 47:53(v/v). Detekce při vlnové délce 300 nm, průtok 1,0 ml/min, teplota na koloně 25řC. Mobilní fází pro AHC-INH byla zvolena směs fosfátového pufru (0,01 M vodný roztok NaH2PO4 . 2 H2O s 2mM EDTA; pH 6.0) a metanolu v poměru 50:50 (v/v). Detekce při vlnové délce 325 nm, průtok 1,0 ml/min, teplota na koloně 25řC. Stabilita obou chelátorů prováděná po dobu 10 hodin v králičí plazmě při teplotě 37řC ukázala rozdílné výsledky. U...

59 8.Abstract High-performance liquid chromatography (HPLC) is one of the most frequently used separation technique for quantitative and qualitative evaluation of drugs. The present paper deals with optimization of the chromatographic conditions and its application to evaluating the stability of two novel iron chelators 2,6DHAF-INH and AHC-INH in rabbit plasma. The derivates were synthetized so as to increase stability of their hydrazone bond compared to their mother compound of salicylaldehyde isonicotinoyl hydrazone (SIH). The best differentiation of the two evaluated derivates, products of their decomposition and internal standard (SIH) was achieved by means of a chromatographic column with a reverse stationary phase LiChroCART HPLC - cartrige LiChrospher 100 RP - 18e (15µm) with a precolumn. The mobile phase for analysis of 2,6DHAF-INH was selected to be a mix of phosphate buffer (0.01 M aqueous solution NaH2PO4 . 2 H2O s 2 mM EDTA; pH 6.0) and methanol in 47:53(v/v) ratio. Detection at 300 nm wave length, flow 1.0 ml/min, column temperature 25 řC were used. The mobile phase for analysis of AHC-INH was selected to be a mix of phosphate buffer (0.01 M aqueous solution NaH2PO4 . 2 H2O s 2mM EDTA; pH 6.0) and methanol in 50:50(v/v) ratio. Detection at 325 nm wave length, flow 1.0 ml/min, column...