Stanovení mikrobiální nálože v infekční ráně

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Tereza Foglová Školitel: prof. MUDr. Jaroslav Dršata CSc. Externí konzultant: MUDr. Jana Matonohová DiS. Název diplomové práce: Stanovení mikrobiální nálože v infekční ráně Výskyt chronických ran stoupá s přibývajícím věkem. Nejčastějším typem chronické rány jsou chronické vředy na nohou, jimiž trpí 1 - 2 % populace v rozvinutých zemí. Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa představují nejčastější agens izolované z chronických ran. Jejich vysoká rezistence k antibiotikům a schopnost tvořit biofilm výrazně prodlužuje hojení, v některých případech jej zcela znemožňuje. V této práci jsme porovnávali metodu stanovení bakteriálního počtu výsevem a kultivací s real-time PCR. Stanovovali jsme druh Pseudomonas aeruginosa ve vzorku prasečí rány infikované in vitro předpěstovaným vícedruhovým biofilmem. V průběhu hojení infikovaných ran jsme odebírali tkáňové biopsie, ze kterých byla určována kultivačně CFU (colony forming unit) a zároveň byla provedena kvantifikace pomocí real-time PCR. Z výsledků kultivace byl zřetelný trend poklesu počtu bakterií v průběhu hojení rány. U real-time PCR nebyl pokles tak zřetelný.

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Tereza Foglová Supervisor: prof. MUDr. Jaroslav Dršata CSc. External consultant: MUDr. Jana Matonohová DiS. Title of diploma thesis: Assessment of microbial load in the infection wound The incidence of chronic wounds rises with age. The most common type of chronic wounds are chronic leg ulcers, which affect 1 - 2 % of the population in the developed countries. Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa are the most common agens isolated from chronic wounds. Their high antimicrobial resistance and ability to form biofilm considerably prolong wound healing, in some cases make it impossible. In this study, we compared the cultivation with real-time PCR. We used the species Pseudomonas aeruginosa for comparison. Pseudomonas aeruginosa was isolated from biofilm, which was a part of artificial wound. We collected tissue biopsies during wound healing. We determined CFU by cultivation and quantification real-time PCR. The results of cultivation was clear downward trend in the number of bacteria in wound healing. Decline was not as pronounced for real-time PCR.