Stanovení indometacinu a jeho rozkladných produktů micelární elektrokinetickou chromatografií

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Dagmar Mitlenerová Školitel: PharmDr. Klára Petrů, Ph.D. Konzultant: doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Název diplomové práce: Micelární elektrokinetická chromatografie pro separaci a stanovení indomethacinu a jeho degradačních produktů V této diplomové práci je popsán vývoj a optimalizace metody micelární elektrokinetické chromatografie (MEKC) pro analýzu indomethacinu a jeho degradačních produktů, kyseliny 4-chlorbenzoové (4CHBA) a kyseliny 5-methoxy-2methyl-3indolyloctové (MMIAA). Separace probíhala v nepotažené křemenné kapiláře (o vnitřním průměru 75 µm, celkové délce 33 cm a efektivní délce 24,5 cm) při vkládaném napětí 15 kV a teplotě kapiláry 25řC. Vlnové délky pro UV detekci byly 224 nm a 234 nm. Optimální základní elektrolyt obsahoval: 10mM dihydrogenfosforečnan sodný, 60mM SDS (pH 7,0) a 10% (v/v) methanol. Vnitřním standardem byla kyselina 1-naftyloctová (5 µg/ml). Pro zvýšení citlivosti metody byla použita metoda zakoncentrování vzorku z velkého objemu. Směs standardů byla dávkována hydrodynamickým tlakem 100 mBar po dobu 10 s (24% celkového objemu kapiláry). Pro zakoncentrování analytů bylo aplikováno napětí -7,5 kV. Polarita byla přepnuta, po dosažení 95% původní hodnoty proudu, na...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Dagmar Mitlenerová Supervisor: PharmDr. Klára Petrů, Ph.D. Consultant: doc. RNDr. Miroslav Polášek, CSc. Title of Diploma Thesis: Micellar electrokinetic chromatography for the separation and assay of indomethacin and its degradations products A new method of micellar electrokinetic chromatography (MEKC) for analysis of indomethacin and its degradation products, 4-chlorbenzoic acid (4CHBA) and 5-methoxy- 2methy-3indolylacetic acid (MMIAA), was developed and optimized. The separation was carried out in uncoated fused silica capillary (with i.d. 75 µm, total length 33 cm and effective length 24,5 cm) with applied voltage 15 kV and temperature of capillary 25ř C. Wave length for UV detection was 224 nm and 234 nm. The optimized background electrolyte contained: 10mM phosphate buffer, 60mM SDS (pH 7,0) and 10% (v/v) of methanol. Internal standard was 1-naftylacetic acid. Large volume sample stacking method was used for sensitivity enhancement. The mixture of standards was injected hydrodynamically at 100 mBar for 10 s (24% of capillary total length). Voltage -7,5 kV was applied for stacking of the analytes. Polarity was switched to +15 kV (time of switching 1,5 min), when 95% of original...