Vývoj HPLC metody pro stanoveni vankomycinu v klinickém výzkumu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Kateřina Kučerová Školitel: RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj HPLC metody pro stanovení vankomycinu v klinickém výzkumu Cílem této diplomové práce bylo vytvořit optimální chromatografické podmínky pro stanovení vankomycinu pro klinický výzkum. K separaci byla využita kolona KinetexTM C18 o rozměrech 50 × 4,6 mm (Phenomenex, USA) s povrchově porézními částicemi o velikosti 2,6 μm. Mobilní fázi tvořil fosfátový pufr o pH 4,5 a acetonitril v poměru 90 : 10. Jako vnitřní standard byl zvolen cefuroxim, který byl spolu s vankomycinem detekován při 220 nm. Po optimalizaci separačních podmínek byla metoda aplikována na biologický materiál. Vzorky byly jednoduše upraveny pouze pomocí precipitačního činidla. Metoda byla částečně validována. Klíčová slova: vankomycin, HPLC-UV, plasma

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Kateřina Kučerová Supervisor: RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Title of diploma thesis: Development of HPLC method for determination of vancomycine in clinical research The aim of this diploma thesis was to develop optimal conditions for the chromatographic determination of vancomycin for clinical routine practice. The chromatographic separation was carried out by KinetexTM C18 column, 2.6 μm particle size, 50 × 4.6 mm (Phenomenex, USA) in combination with potassium phosphate buffer (pH 4.5) and acetonitrile (90 : 10, v/v) as the mobile phase. As internal standard was chosen cefuroxime. For analytes determination UV detection at 220 nm wavelength was applied. After optimization of separation conditions, the method was applied to biological material. Samples were easily modified using the protein precipitation. The method was partially validated. Keywords: vancomycin, HPLC-UV, plasma samples