Hodnocení exprese ICAM-1 a P-selektinu v aortě myší s vysokými hladinami sérového endoglinu pomocí Western blot analýzy.

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Autor: Barbora Uhlířová Školitel: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení exprese ICAM-1 a P-selektinu v aortě myší s vysokými hladinami sérového endoglinu pomocí Western blot analýzy Cíl práce: Detekce a následné vyhodnocení exprese adhezních molekul ICAM-1 a P- selektinu v aortě dvou skupin transgenních myší lišících se hladinami lidského sérového endoglinu, které byly krmeny speciální dietou s vysokým obsahem tuku a cholesterolu. Metody: Použili jsme 6 měsíců staré samice transgenních myší schopných exprese lidského endoglinu, který po odštěpení do cirkulace (tzv. solubilní endoglin - sENG) bylo možné stanovit pomocí ELISA analýzy a rozdělit myši do dvou skupin - sledovaná (vysoké hladiny sENG) a kontrolní (velmi nízké hladiny sENG). Oběma skupinám byla po dobu 3 měsíců podávána speciální dieta s vysokým obsahem tuku a cholesterolu. Byla provedena biochemická analýza (hladiny celkového cholesterolu) a Western blot analýza molekul ICAM-1 a P-selektinu v homogenátu myších aort. Výsledky: Biochemická analýza celkového cholesterolu v krvi neprokázala statisticky významné rozdíly v naměřených hodnotách mezi oběma zkoumanými skupinami myší. Western blot analýza prokázala...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Author: Barbora Uhlířová Supervisor: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Western blot analysis of ICAM-1 and P-selectin protein expression in aorta of mice with high soluble endoglin levels Background: Detection and subsequent evaluation of the expression of adhesion molecules ICAM-1 and P-selectin in aorta of two groups of transgenic mice differing by levels of human serum endoglin that were fed a special high fat and cholesterol diet. Methods: We used six-month-old female transgenic mice capable of expressing of human endoglin, which was able to be determined after cleavage in the circulation (Soluble endoglin - sENG) by the use of an ELISA assay. Therefore, we were able to divide the mice into two groups - an experimental group (high levels of sENG) and a control group (very low sENG levels). For 3 months, both groups were given a special high fat and cholesterol diet. Biochemical analysis (total cholesterol levels), and Western blot analysis of molecules ICAM-1 and P-selectin in the homogenate of mouse aortas were carried out. Results: Biochemical analysis of total cholesterol in the blood revealed statistically no significant differences in the measured values...