Využití elektroforetických a chromatografických metod pro klinický výzkum
The application of electrophoretic and chromatographic methods in clinical research
dizertační práce (OBHÁJENO)
Zobrazit/ otevřít
Trvalý odkaz
http://hdl.handle.net/20.500.11956/59530Identifikátory
SIS: 37218
Kolekce
- Kvalifikační práce [3146]
Vedoucí práce
Oponent práce
Pacáková, Věra
Křepela, Evžen
Fakulta / součást
3. lékařská fakulta
Obor
-
Katedra / ústav / klinika
Ústav biochemie, buněčné a molekulární biologie 3. LF UK
Datum obhajoby
22. 4. 2014
Nakladatel
Univerzita Karlova, 3. lékařská fakultaJazyk
Čeština
Známka
Prospěl/a
disertační práce Řešitel: RNDr. Jana Fauknerová Matějčková Téma: Využití elektroforetických a chromatografických metod pro klinický výzkum Malondialdehyd (MDA) je považován za hlavní biomarker oxidativního poškození biomembrán a jeho zvýšená hladina se projevuje u různých onemocnění. Pro stanovení MDA byla použita HPLC metoda s derivatizací vzorku krevní plazmy 2,4-dinitrofenylhydrazinem. Vzniklý derivát MDA lze snadno oddělit pomocí HPLC od ostatních komponent krevní plazmy a detekovat jej při 307 nm. Doba analýzy MDA nepřesahuje 4,5 min. Citlivost (limit detekce 0,27 mol l-1 ) a opakovatelnost stanovení je dostatečná pro monitorování hladiny MDA v reálných vzorcích krevní plazmy. Ve své práci jsem dále sledovala hladiny nízkomolekulárního sekundárního antioxidantu kyseliny močové, jejíž koncentrace v krvi dosahuje 140 až 340 µmol l-1 a sekundárního enzymatického antioxidantu superoxiddismutázy (SOD). Analýza hladin kyseliny močové byla prováděna metodou kapilární elektroforézy a spektrofotometrickou metodou, přičemž obě metody vykazovaly srovnatelné výsledky. Analýza SOD byla prováděna pomocí spektrofotometrického kitu. Hladiny MDA byly proměřovány u veganů (odmítání jakékoliv živočišné stravy, vegani nekonzumují žádné maso ani vejce a mléčné výrobky) s průměrnou hodnotou MDA 5 mol l-1 , což je...
- The application of electrophoretic and chromatographic methods in clinical research RNDr. Jana Fauknerová Matějčková Malondialdehyde (MDA) is considered to be the main biomarker for oxidative damage to biomembranes and an elevated level of this compound can act as an indicator for a number of diseases. I determined MDA using a HPLC method based on derivatization of blood plasma samples with 2,4-dinitrophenylhydrazine. I used HPLC to separate the MDA derivatives from the other components of the blood plasma and detected them at 307 nm. The MDA analysis time did not exceed 4.5 min. The sensitivity (detection limit 0.27 mol l-1 ) and repeatability of the determination of MDA are sufficient for monitoring the MDA level in real blood plasma samples. My work also describes monitoring the level of the low-molecular secondary antioxidant of uric acid, whose concentration in the blood attains values of 140 to 350 µmol l-1 and the secondary enzymatic antioxidant of superoxide dismutase (SOD). The uric acid level was analysed by the capillary electrophoresis and spectrophotometric methods, where the two methods yielded comparable results. SOD was analysed using a spectrophotometric kit. The MDA levels were measured for vegans (who refuse to eat any food of animal origin, meat, eggs and also dairy...