Katechiny: interakce s lidským sérovým albuminem a ovlivnění jeho glykace methylglyoxalem

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Veronika Staňková Školitel: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název práce: Katechiny: interakce s lidským sérovým albuminem a ovlivnění jeho glykace methylglyoxalem. Katechiny (flavan-3-oly) jsou polyfenolické látky vyšších rostlin vyznačující se širokým spektrem biologických a farmakologických vlastností. První část této práce se zaměřuje na studium interakcí čtyř katechinů, konkrétně (-)-katechinu, (-)-gallokatechinu, (-)-katechingallátu a (-)-gallokatechingallátu s lidským sérovým albuminem (HSA). HSA je hlavním transportním proteinem v krevním séru, který ovlivňuje metabolismus, biodostupnost a biologickou aktivitu látek in vivo. Vazebná schopnost katechinů k HSA byla hodnocena in vitro s využitím UV/VIS spektroskopie, fluorescenční spektroskopie a gelové elektroforézy (nativní a SDS-PAGE). Vazebná schopnost katechinů k HSA se lišila v závislosti na jejich chemické struktuře a koncentraci. Stěžejním strukturním rysem nezbytným pro interakci katechinu s molekulou HSA se ukázala být přítomnost zbytku kyseliny gallové a počet OH skupin ve struktuře. Druhá část práce hodnotí schopnost katechinů ovlivnit neenzymovou glykaci lidského sérového albuminu zprostředkovanou methylglyoxalem. Neenzymová...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Mgr. Veronika Staňková Supervisor: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Title of thesis: Catechins: interaction with human serum albumin and affecting its glycation by methylglyoxal. The catechins (flavan-3-ols) are polyphenolic substances of higher plants exerting a wide spectrum of biological and pharmacological properties. The first part of this thesis was focused on the study of potential interactions of four catechins (namely (-)-catechin, (-)-gallocatechin, (-)-catechin gallate, and (-)-gallocatechin gallate) with human serum albumin (HSA). HSA is the main transport protein in the blood serum, which influences the metabolism, bioavailability and biological activity of drugs in vivo. Binding ability of catechins to HSA was evaluated in vitro using UV/VIS spectroscopy, fluorescence spectroscopy, and gel electrophoresis (native and SDS-PAGE). Binding ability of catechins to HSA varied depending on their chemical structure and concentration. The presence of galloyl moiety and number of hydroxyl groups were found to be key structural features essential for catechin interaction with the molecule of HSA. In the second part of this work, the ability of catechins to influence methylglyoxal-induced...