Modifikace vybraných biotransformačních enzymů v průběhu stárnutí (u potkana)

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Erika Vyskočilová Supervisor: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Title of diploma thesis: MODIFICATION OF SELECTED BIOTRANSFORMATION ENZYMES DURING AGEING (IN RAT) Ageing is an inevitable biological process characterized by progressive functional decline of all organ systems with simultaneous increase in oxidative damage as a result of reactive oxygen species (ROS) accumulation. Increased activity of antioxidant enzymes, such as peroxidase and catalase, is related to increased production of ROS during ageing. Activity of biotransformation enzymes such as cytochrome P450 (CYP) and glutathion-S-transferase (GST) changes during ageing too. In general, activity of enzymes is lower in very young and very old individuals than in the period of adulthood. The aim of the present work was to study age-related changes in activities and expression of selected xenobiotic-metabolizing enzymes (GST, CYP 1A, CYP 2B, CYP 3A4) and antioxidant enzymes (catalase, peroxidase, superoxiddismutase) in rat liver. Male Wistar rats were sacrificed by decapitation under ether anesthesia at the age of 6 weeks and 21 months (6 individuals in each group). Subsequently, liver specimens were processed to obtain the subcellular...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Erika Vyskočilová Školitel: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: MODIFIKACE VYBRANÝCH BIOTRANSFORMAČNÍCH ENZYMŮ V PRŮBĚHU STÁRNUTÍ (U POTKANA) Stárnutí je nezastavitelný biologický proces charakterizovaný progresivním útlumem funkce orgánových systémů a současným nárůstem oxidačního poškození v důsledku kumulace reaktivních forem kyslíku (ROS). Zvýšená aktivita antioxidačních enzymů, například peroxidasy a katalasy, v průběhu stárnutí tedy souvisí se zvýšenou produkcí ROS. Aktivita biotransformačních enzymů například cytochromu P450 (CYP) a glutathion-S-transferasy (GST) se také v průběhu stárnutí mění. Zpravidla, u velmi mladých a velmi starých jedinců je aktivita nižší než v období dospělosti. Cílem práce bylo sledovat změny v aktivitě a expresi vybraných jaterních biotransformačních (GST, CYP 1A, 2B, 3A4) a antioxidačních (peroxidasa, katalasa, superoxiddismutasa) enzymů u potkanů v souvislosti s věkem. Potkaní samci kmene Wistar byli utraceni dekapitací v celkové anestezii ve věku 6 týdnů a 21 měsíců (6 jedinců v každé skupině). Následně byla jejich játra zpracována na subcelulární frakce (mikrosomy a cytosol), v nichž byly spektrofluorimetricky a spektrofotometricky stanoveny...