Modulační účinky quercetinu a rutinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A ve střevních buňkách

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Marie Volková Supervisor: Doc. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Title of diploma thesis: Modulatory effects of Quercetin and Rutin on the activity and expression of cytochrome P4501A in the intestinal cells Flavonoids originate as the secondary metabolites of plants and they are daily consumed in fruits and vegetables. They show the antioxidant, antiinflammatory, anticarcinogenic and other healthy effects. A potential anticarcinogenic effect is mediated by the strong antioxidant activity, but it can also include an inhibition of xenobiotica - metabolizing enzymes to the carcinogenic compounds. This work has examined the potential inhibition effect of the flavonoids Rutin and Quercetin on an activity and expression of cytochrome P4501A (CYP1A) in the intestinal cells. Quercetin is the most abundant flavonoid and Rutin is its most abundant glycosidic form. CYP1A is responsible for an activation of many pre - carcinogenic ingested substances. The study was conducted on the intestinal cell line HCT-8. CYP1A's enzymatic activity was measured by EROD/MROD activity; quantity of CYP1A's protein was set by Western blotting. Quercetin at the concentration of 1 µM caused slightly increased EROD/MROD...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Marie Volková Školitel: Doc. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Modulační účinky quercetinu a rutinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A ve střevních buňkách Flavonoidy vznikají jako sekundární metabolity rostlin a jsou denně konzumovány v ovoci a zelenině. Vykazují antioxidační, protizánětlivé, antikarcinogenní a další prospěšné vlastnosti. Jejich potenciální antikarcinogenní vliv je zprostředkován silným antioxidačním působením, může ale zahrnovat i inhibici enzymů metabolizujících xenobiotika na karcinogenní sloučeniny. V této práci byl zkoumán potenciální inhibiční vliv flavonoidů rutinu a quercetinu na aktivitu a expresi cytochromu P4501A (CYP1A) ve střevních buňkách. Quercetin je nejčastěji se vyskytující zástupce flavonoidů a rutin jeho nejběžnější glykosidická forma. CYP1A je zodpovědný za aktivaci řady prekarcinogenních látek přijímaných potravou. Studie byla provedena na střevní linii HCT-8. Enzymová aktivita CYP1A byla měřena stanovením EROD/MROD aktivity, množství proteinu CYP1A bylo stanoveno pomocí Western blottingu. Quercetin v koncentraci 1 µM způsoboval mírné zvýšení EROD/MROD aktivity, vyšší koncentrace quercetinu však aktivitu EROD/MROD výrazně snižovaly....