Využití HPLC pro stanovení barviv ilegálně používaných v potravinách

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Tereza Šmidrkalová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Využití HPLC pro stanovení barviv ilegálně používaných v potravinách Tato diplomová práce se zabývá hledáním optimálních podmínek pro stanovení sudanových barviv. Pro stanovení byla využita vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). V průběhu experimentů bylo testováno několik kolon, různé mobilní fáze a různé typy gradientových elucí. Pro validaci separačních podmínek byla použita kolona na Ascentis Express F5 (100 x 4,6 mm, 2,7 μm). Detekce byla provedena při vlnové délce 500 nm a 426 nm. Separace probíhala za gradientové eluce s mobilní fází acetonitril - voda průtokovou rychlostí 1 ml/min. Nástřik byl 5 μl. Při měření validačních parametrů bylo využito před vlastní separací látek on-line SPE extrakce v HPLC systému na předkolonce Ascentis Express C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 μm) s promývací mobilní fází 5% roztok acetonitrilu s vodou. Optimalizace a validace metody proběhla pouze na standardech a metoda byla navržena pro další testování a použití na reálných vzorcích. Klíčová slova: HPLC, sudanová barviva

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Tereza Šmidrkalová Supervisor: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Using of HPLC for illegal colorants determination in foods. This thesis deal with looking for optimal conditions for determination of Sudan dyes. High performance liquid chromatography (HPLC) was used for determination. During searching several various columns and mobile phases were tested. For validation of separation conditions Ascentis Express F5 column (100 x 4,6 mm, 2,7 μm) was used. Detection was measured at a wavelength of 500 nm and 426 nm. Separation used gradient elution with mobile phase of acetonitrile - water at a flow rate 1 ml/min. Injection volume was set to 5 μl. During measuring validation parametres was used on-line SPE extraction in HPLC system on precolumn Ascentis Express C18 (5 x 4,6 mm, 2,7 μm) with washing mobile phase 5% solution of acetonitril - water before separation. Optimalization and validation used only standards and method was suggested for other testing and using real samples. Keywords: high performance liquid chromatography (HPLC), Sudan dyes