Exprese CA IX antigenu u urogenitálních nádorů, zejména se zaměřením na karcinom ledviny a uroteliální tumory dolních močových cest

Abstract

Souhrn Práce se zabývá studiem karbonické anhydrázy IX, která je přítomna na membránách buněk některých urologických nádorů, jako možného nádorového markeru. Cílem studie bylo především: 1) vyšetřit uvolňování solubilní formy karbonické anhydrázy IX z buněk stabilních nádorových linií a z krátkodobých kultur lidských nádorů do kultivačního média, 2) stanovit koncentrace s-CA IX v tělních tekutinách u nemocných s RCC a UC, 3) zhodnotit vliv velikosti nádoru nebo gradeu na koncentrace s-CA IX a 4) pokusit se zhodnotit možnost využití stanovení s-CA IX jako možného markeru těchto nádorů. Vytvořili jsme dvě skupiny: 1. nemocní s RCC, 2. nemocní s UC vývodných močových cest. V obou skupinách byly kromě pacientů s příslušnými nádory testovány kontrolní skupiny zdravých dobrovolníků a nemocných s nenádorovými onemocněními urogenitálního traktu a non-RCC nádory. U všech nemocných byla hodnocena velikost nádoru rtg zobrazovacími metodami (sono, CT, NMR), endoskopicky nebo změřením tumoru při patologickém vyšetření preparátu. K průkazu CA IX antigenu ve vzorcích nádorů jsme použili imunohistochemické barvení pomocí monoklonální protilátky MAb M75. V extraktech z nádorů a tělních tekutinách jsme koncentraci CA IX a s-CA IX stanovovali metodou western blot nebo ELISA. Výsledky: V 1. skupině jsme v séru zjistili s-CA IX...

Except testicular tumors and prostate carcinoma, there is lack of tumor markers in urogenital tumors. Carbonic anhydrase IX protein (CA IX) is a cell membrane protein, which can be ectopically expressed in various human tumors. It is often expressed as a response of tumor cells to hypoxia, which escalates invasivity of the tumor. In consequence, CA IX was proposed as a marker of poor prognosis. Its presence was proved by immunohistochemistry in renal cell carcinoma (RCC) and transitional cell carcinoma (TCC) of urinary tract. We study CA IX as a possible tumor marker. Presence of CA IX protein in tumor tissue was examined by imunohistochemistry, in serum and urine CA IX concentrations by immunoprecipitation of CA IX followed by Western blotting in combination with enhanced chemiluminiscence or ELISA. From our results we proved positive concentrations of soluble CA IX (s-CA IX) in 74,3% serum and in 63,3% urine samples in RCC group. In TCC group s-CA IX was positive in 69,6 % urine samples. Serum concentrations were all negative in this group. There was rapid decrease of s-CA IX concentration in serum after surgical removal of tumor with half-time 1- 2 days. s-CA IX is not detectable in blood and urine in healthy volunteers. In these days s-CA IX is not suitable marker of RCC and TCC. Nevertheless,...