Charakterizace lidské membránově vázané karbonylreduktasy

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Michaela Zvěřinová Vedoucí práce: prof. Ing. Vladimír Wsól Ph.D. Název diplomové práce: Charakterizace lidské membránově vázané karbonylreduktasy Redukční enzymy se podílí na metabolismu celé řady látek ať už tělu vlastních nebo cizích. Do skupiny redukčních enzymů patří také zástupci karbonylreduktasy. Tyto enzymy mohou být buď rozpustné cytosolické nebo vázané do membrány endoplazmatického retikula, mitochondrií či peroxisomů a řadí se do nadrodin SDR, AKR nebo MDR enzymů. Až výzkumy v posledních letech se zaměřují zejména na charakterizaci mikrosomálních karbonylreduktas. Jedinou mikrosomální karbonylreduktasou, která se podílí na metabolismu xenobiotik je 11β-hydroxysteroiddehydrogenasa 1 (11β-HSD1). Při výzkumu biotransformace oracinu se ukázalo, že existuje rozdíl mezi jeho metabolismem v lidských jaterních mikrosomech a purifikovanou 11β-HSD1. Vznikla proto domněnka, že se na jeho metabolismu podílí ještě enzym doposud neznámý, který byl purifikován. Karbonylreduktasy mají širokou substrátovou specifitu a mimo jiné se podílí na metabolismu nejsilnějšího karcinogenu tabákového kouře NNK. Působením těchto enzymů se NNK redukuje na NNAL, který může být vyloučen z organismu. Cílem této...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Michaela Zvěřinová Supervisor: prof. Ing. Vladimír Wsól Ph.D. Title of diploma thesis: Characterization of a new human membrane-bound carbonyl reductase Reducing enzymes are involved in the metabolism of eobiotics and xenobiotics. Carbonyl reductases also belong to the group of reducting enzymes. These are grouped into three protein superfamilies, the SDR, AKR or MDR and they can be either soluble cytosolic or membrane-bound to endoplasmatic reticulum, mitochondria and peroxisomes. Recent research has focused mainly on characterization of microsomal carbonyl reducing enzymes. It has been decribed, only one microsomal carbonyl reductase in metabolism of xenobiotics, 11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1. There is a discrepancy in metabolism of oracin between human liver microsomes and purified 11β-hydroxysteroid dehydrogenase 1 so an unknown microsomal carbonyl reductase participates in oracin biotransformation. This enzyme was purified. Carbonyl reductases have broad substrate specificity and also metabolize the strongest tobacco smoke carcinogen NNK. These enzymes reduce NNK to NNAL that can be excrected. The aim of this thesis is to optimize the method for determining metabolite NNAL...