Studium membránového transportu albuminu v ledvinách in vitro

Abstract

Mgr. Martin Suchan 2010 Hradec Králové Doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Katedra farmakologie a toxikologie Abstrakt Cíl: Práce byla zaměřena na studium transportu albuminu in vitro pomocí akumulačních buněčných studií a s využitím dvou typů albuminu - albuminu značeného techneciem- 99m a FITC-albuminu značeného fluorescenční sondou. Součástí práce bylo ověření optimální přípravy a hodnocení kvality 99m Tc-albuminu. Cílem bylo porovnat akumulaci obou typů albuminu v ledvinných buňkách, zjistit vliv vybraných faktorů na akumulaci albuminu, stanovit typ mechanismu transmembránového transportu albuminu a zpracovat získané výsledky do formy odborného vědeckého sdělení. Metody: Ke značení albuminu techneciem-99 bylo použito optimalizovaného postupu za použití nízkého pH, vysoké koncentrace albuminu a optimální koncentrace cínatých iontů. Radiochemická čistota 99m Tc-albuminu byla ověřována chromatografií na papíře. Jako buněčné in vitro modely byly použity izolované nativní ledvinné buňky potkana a standardní linie ledvinných tubulárních buněk prasete LLC-PK1. V akumulačních studiích byl sledován uptake albuminu v závislosti na teplotě, čase, složení inkubační směsi, přítomnosti inhibitoru transportu a byl hodnocen vliv experimentálního modelu. U LLC-PK1 buněk byl též testován vliv stáří buněk na míru...