Změna kvality povrchu alogenního chlopenního štěpu během zpracování - morfologické změny sledované skenovacím mikroskopem

Abstract

Cíl: Alogenní srdeční chlopně (AHV), biologické chlopně lidského původu, nabízejí potenciální výhody oproti konvenčním xenogenním chlopním, a to z hlediska lepší hemodynamiky a možná i vyšší trvanlivosti. Nejdůležitějšími faktory pro dlouhodobou klinickou funkčnost AHV jsou metody zpracování a kryokonzervace. Cílem této studie bylo zhodnotit dopad současného zpracovatelského protokolu na morfologii tkáně chlopně, především se zaměřením na vliv jednotlivých kroků zpracování na strukturu povrchu cípu chlopně. Pro detekci jemných změn v endotelovém pokryvu a podkladových vrstvách byla použita naše vlastní modifikace techniky rastrovací elektronové mikroskopie (SEM). Materiál a metody: Studie byla založena na zkoumání 20 AHV (40 vzorků). Čtrnáct chlopní pocházelo od dárců se srdeční činností (víceorgánový odběr), kdy z různých důvodů nemohlo dojít k transplantaci srdce (kritéria dárce, dostupnost příjemce a/nebo logistika). Šest bylo získáno při rutinních posmrtných odběrech - dárci bez srdeční činnosti (NHBD). Všechny vzorky byly fixovány v Bakerově roztoku. Vzorky tkáně byly disekovány, vysušeny pomocí hexamethyldisilazanu (HMDS), pokoveny zlatem, zkoumány a fotografovány pomocí SEM (Tesla BS 301). Pro definování integrity endotelu, subendotelových vrstev a kvality povrchu pod SEM byla zavedena speciální...

Objective: Allograft heart valves (AHV), biological valves of human origin, offer potential advantages over conventional xenografts in terms of superior hemodynamics and, perhaps, better durability. The most important factors for long-term AHV clinical performance are the processing and cryopreservation methods. The aim of this study was to evaluate the impact of current processing protocol on valve tissue morphology, mainly to address the effect of successive processing steps on the leaflet surface structure. For the detection of fine changes in endothelial covering and underlying layers, our own modification of the scanning electron microscopy (SEM) technique was utilized. Material and methods: The study was based on an investigation of 20 AHV (40 specimens). Fourteen valves came from heart-beating donors (multiorgan harvesting) when the heart could not be transplanted for any reason (donor criteria, availability of recipient and/or logistics). Six were obtained at the time of routine postmortems - non heart-beating donors (NHBD). All specimens were initially fixed in Baker's solution. Tissue samples were dissected, dried with hexamethyldisilazane (HMDS), gold-coated, studied and photographed by SEM (Tesla BS 301). In order to define the integrity of the endothelium, subendothelial layers and the quality...