Vývoj a validace HPLC metody pro analýzu fenobarbitalu, papaverinu a chininu v léčivém přípravku

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Markéta Volfíková Supervisor: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Title of the diploma thesis: Development and validation of the HPLC method for the analysis of phenobarbital, papaverine, and quinine in the pharmaceutical formulation The aim of this diploma thesis was the development and validation of a method for the simultaneous analysis of phenobarbital, papaverine, and quinine in anti-spasmodic capsules prepared in the hospital pharmacy of the Institute for Clinical and Experimental Medicine using high-performance liquid chromatography. During the method development, several chromatographic columns were tested, including those packed with newly developed types of stationary phases. The final analysis was performed on an Ascentis Express 90 Å AQ-C18 column (15 cm × 4.6 mm) packed with 2.7 µm core-shell particles. The mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile and water acidified with phosphoric acid to pH 2.4, with the addition of triethylamine at a concentration of 350 μL/L, resulting in a final pH of 2.55. The mobile phase flow rate was set to 1.2 mL/min and the injection volume was 0.5 μL. Separation was carried out under isocratic conditions at a temperature of 25 řC, and the...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Markéta Volfíková Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj a validace HPLC metody pro analýzu fenobarbitalu, papaverinu a chininu v léčivém přípravku Předmětem této diplomové práce byl vývoj a validace metody pro současnou analýzu fenobarbitalu, papaverinu a chininu v tobolkách proti křečím připravených v nemocniční lékárně Institutu klinické a experimentální medicíny za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. V rámci vývoje metody bylo vyzkoušeno několik kolon, včetně těch, které byly naplněny vývojově novými typy stacionárních fází. Finální analýza byla provedena na koloně Ascentis Express 90 Å AQ-C18 15 cm x 4,6 mm, s povrchově porézními částicemi o průměru 2,7 μm. Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitrilu a vody okyselené kyselinou fosforečnou na pH 2,4 s přídavkem triethylaminu v koncentraci 350 μl/l (výsledné pH bylo 2,55). Průtok mobilní fáze byl nastaven na 1,2 ml/min a objem nástřiku činil 0,5 μl. Separace probíhala za isokratických podmínek při teplotě 25 řC a celková doba analýzy byla 5 minut. Detekce všech sledovaných látek probíhala při vlnové délce 200 nm. Následná validace potvrdila vhodnost této metody pro analýzu uvedených látek v léčivém...